右旋糖酐、卡拉膠和羧甲基殼聚糖對豬精液冷凍保存效果的研究.pdf

1、精液冷凍保存技術(shù)的發(fā)展使得優(yōu)質(zhì)種公畜的遺傳資源得以在廣大的范圍內(nèi)流動，大大提高了畜牧業(yè)遺傳品質(zhì)的改良速度。近年來，人工授精技術(shù)已在全牛的養(yǎng)牛業(yè)中廣泛使用，已產(chǎn)生相當(dāng)成熟的產(chǎn)業(yè)鏈，而人工授精技術(shù)在豬的生產(chǎn)上尚未形成規(guī)?；瘧?yīng)用。其主要原因是豬精子對低溫刺激以及冷凍的極端敏感，容易由于溫度驟變以及冷凍產(chǎn)生不可逆的損傷，因此對豬精液冷凍保護劑和冷凍流程研發(fā)造成了很多困難。豬精子在冷凍凍融后，其精子活力和活率會出現(xiàn)明顯的下降，精子質(zhì)膜、線粒體膜以

2、及頂體的完整性會遭到很大程度的破壞，這些損傷使得經(jīng)過冷凍保存的豬精液的精子質(zhì)量以及授精能力嚴(yán)重下降，以至于無法滿足人工授精的需求，因而成為了豬的人工授精的技術(shù)瓶頸，阻礙了其在畜牧業(yè)中的應(yīng)用和推廣。為了提高豬精液在冷凍保存后的品質(zhì)，本研究采用在冷凍稀釋液中分別添加不同濃度的右旋糖苷、卡拉膠和羧甲基殼聚糖，通過檢測經(jīng)過冷凍保存后的豬精子的活力和活率、精子膜類結(jié)構(gòu)的完整性水平以及脂質(zhì)過氧化物MDA水平和超氧化物歧化酶SOD的活性，得到了以下結(jié)

3、果:
　　1在冷凍稀釋液中添加的右旋糖酐能夠顯著提高豬精子在凍融后的質(zhì)量(P≤0.05)。其中，當(dāng)右旋糖酐的添加量在0.8mg/mL時對豬精子有著最好的保護效果，其精子活力、精子活率分別達到了57.7％和52.3％，其質(zhì)膜完整性、線粒體膜完整性以及頂體完整性分別達到了56.7％、38.3％和60.0％。同時，通過在冷凍稀釋液中添加右旋糖酐，還在一定程度上緩解了精子受到的氧化損傷。豬精子冷凍后的MDA水平和SOD水平隨著右旋糖酐的添

4、加量的提高逐漸下降和提升，分別在0.8mg/mL和1.0mg/mL時到達了1.93nmol/mg蛋白和107.1U/mg蛋白。
　　2.卡拉膠作為冷凍保護劑，顯著提升了經(jīng)過冷凍保存的豬精子的各項生理指標(biāo)(P≤0.05)，其最適宜添加量為0.8mg/mL。此時豬精子冷凍后的活力、活率，以及頂體完整性、線粒體膜完整性、質(zhì)膜完整性分別達到了55.0％、50.3％、53.7％、40.7％和60.3％，顯著高于對照組(P≤0.05)。尤其值

5、得注意的是，卡拉膠在豬精液的冷凍保存中展現(xiàn)出了較強的抗氧化性，隨著卡拉膠添加量的上升，精子凍后的脂質(zhì)過氧化物MDA水平持續(xù)下降，SOD水平穩(wěn)步上升，并在0.8mg/mIL和1.0mg/mL時分別達到MDA的最低值1.79nmol/mg蛋白以及SOD活性的最大值122.8U/mg蛋白。
　　3.添加在冷凍稀釋液中的羧甲基殼聚糖在精液冷凍的過程中起到了保護了豬精子的作用，且其最適宜添加量為0.6mg/mL。此時豬精子的凍后活力及活率分

6、別為54.0％和52.1％，同時，羧甲基殼聚糖對精子膜結(jié)構(gòu)表現(xiàn)出了顯著的保護作用（P≤0.05），其線粒體膜完整性、精子質(zhì)膜完整性和頂體完整性分別為40.5％、52.2％和59.1％。在本研究中，羧甲基的聚糖的抗氧化性為三種多糖中最強的，其添加量在在0.8mg/mL時，精液中MDA水平達到最低值1.44nmol/mg蛋白，而SOD活性在0.6mg/mL時達到最大值116.9U/mg蛋白。
　　以上試驗結(jié)果表明，添加在冷凍稀釋液中的