稻瘟病拮抗海洋細(xì)菌HW-14分離、鑒定及其抗菌物質(zhì)的研究.pdf

1、分類號：密級：學(xué)校代碼：!=Q!魚墨學(xué)號：201011200遣掌師耗大學(xué)碩士學(xué)位論文⑨稻瘟病拮抗海洋細(xì)菌HW14分離、鑒定及其抗菌物質(zhì)的研究作者學(xué)科、研究導(dǎo)師姓名專ql／’‘一方向姓名2013年6月遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要稻瘟病是世界各地的水稻種植區(qū)最嚴(yán)重的病害之一。化學(xué)農(nóng)藥在防治過程中長期及大量的使用，導(dǎo)致了嚴(yán)重的食品安全和環(huán)境安全問題，受到了人們的廣泛關(guān)注。因此，開發(fā)微生物源農(nóng)藥防治稻瘟病十分重要。隨著越來越多的海洋微生物的發(fā)現(xiàn)

2、，人們開始著眼于獨(dú)特生存環(huán)境的海洋微生物，發(fā)現(xiàn)了許多結(jié)構(gòu)特異、新穎的新型化合物，所以從海洋中開發(fā)新型活性物質(zhì)己成為各國科學(xué)家當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。本試驗(yàn)旨在從海洋中分離并篩選出對水稻稻瘟病菌有較強(qiáng)拮抗作用的海洋微生物，并對菌株分類鑒定、發(fā)酵條件的優(yōu)化及其抑菌物質(zhì)等作研究，以期為生物防治稻瘟病菌提供新型微生物農(nóng)藥資源。通過平板稀釋法分離得到184株菌。以稻瘟病菌815為指示病原菌，采用牛津杯法對分離獲得的菌株進(jìn)行初步篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，有拮抗作用的

3、海洋細(xì)菌有9株。采用平板對峙法對獲得的9株菌進(jìn)行抗性復(fù)篩，發(fā)現(xiàn)HW14菌株抑菌效果最明顯，而且對其他稻瘟病菌生理小種都有抑菌活性，且抑菌圈直徑都在18mm以上。采用平板對峙法對禾谷病(FusariumgraminearumSchw)、玉米大斑病(Exerohilumturcicum)、尖刀鐮孢菌(FoxysporumfspVasinfectum)、煙草黑脛病(Phytophthoramcotianae)拮抗實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，HW14菌株對

4、上述幾種病原真菌均有一定的抑制效果。通過對HW14菌株形態(tài)的觀察、生理生化特征及16SrDNA同源性序列分析，鑒定其為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)。通過單因子試驗(yàn)，對HW14菌株的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明，HW14菌株最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度30。C，培養(yǎng)基初始pH值為70，發(fā)酵時(shí)間為72h，接種量為6％，250mL發(fā)酵搖瓶裝液量為80mL，搖床培養(yǎng)振蕩轉(zhuǎn)速為180r／min。光學(xué)和掃描電子顯微鏡觀察表明，HW