稻瘟病拮抗海洋細菌HW-14分離、鑒定及其抗菌物質的研究.pdf

1、分類號：密級：學校代碼：!=Q!魚墨學號：201011200遣掌師耗大學碩士學位論文⑨稻瘟病拮抗海洋細菌HW14分離、鑒定及其抗菌物質的研究作者學科、研究導師姓名專ql／’‘一方向姓名2013年6月遼寧師范大學碩士學位論文摘要稻瘟病是世界各地的水稻種植區(qū)最嚴重的病害之一?；瘜W農(nóng)藥在防治過程中長期及大量的使用，導致了嚴重的食品安全和環(huán)境安全問題，受到了人們的廣泛關注。因此，開發(fā)微生物源農(nóng)藥防治稻瘟病十分重要。隨著越來越多的海洋微生物的發(fā)現(xiàn)

2、，人們開始著眼于獨特生存環(huán)境的海洋微生物，發(fā)現(xiàn)了許多結構特異、新穎的新型化合物，所以從海洋中開發(fā)新型活性物質己成為各國科學家當前研究的熱點。本試驗旨在從海洋中分離并篩選出對水稻稻瘟病菌有較強拮抗作用的海洋微生物，并對菌株分類鑒定、發(fā)酵條件的優(yōu)化及其抑菌物質等作研究，以期為生物防治稻瘟病菌提供新型微生物農(nóng)藥資源。通過平板稀釋法分離得到184株菌。以稻瘟病菌815為指示病原菌，采用牛津杯法對分離獲得的菌株進行初步篩選，結果發(fā)現(xiàn)，有拮抗作用的

3、海洋細菌有9株。采用平板對峙法對獲得的9株菌進行抗性復篩，發(fā)現(xiàn)HW14菌株抑菌效果最明顯，而且對其他稻瘟病菌生理小種都有抑菌活性，且抑菌圈直徑都在18mm以上。采用平板對峙法對禾谷病(FusariumgraminearumSchw)、玉米大斑病(Exerohilumturcicum)、尖刀鐮孢菌(FoxysporumfspVasinfectum)、煙草黑脛病(Phytophthoramcotianae)拮抗實驗，結果表明，HW14菌株對

4、上述幾種病原真菌均有一定的抑制效果。通過對HW14菌株形態(tài)的觀察、生理生化特征及16SrDNA同源性序列分析，鑒定其為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)。通過單因子試驗，對HW14菌株的培養(yǎng)條件進行優(yōu)化。試驗結果表明，HW14菌株最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度30。C，培養(yǎng)基初始pH值為70，發(fā)酵時間為72h，接種量為6％，250mL發(fā)酵搖瓶裝液量為80mL，搖床培養(yǎng)振蕩轉速為180r／min。光學和掃描電子顯微鏡觀察表明，HW