姜瘟病病原拮抗菌的篩選與鑒定.pdf

1、本次課題的研究對(duì)象—生姜具有多種功效，不僅可以作為藥用，而且還有發(fā)汗、溫胃、潤(rùn)肺止咳、解毒等作用。但是隨著我國(guó)生姜出口需求量的增加，在生姜栽培的過(guò)程中，容易感染以青枯菌為首的病害，姜瘟病嚴(yán)重的影響了我國(guó)生姜的品質(zhì)，造成了大量生姜田地的絕收。姜瘟病病原主要是由青枯假單胞桿菌引起。目前在姜瘟病防治上主要采用物理、化學(xué)和生物防治，最常用的生物防治方法主要是通過(guò)篩選有效的拮抗菌，在生姜根莖部定殖對(duì)姜瘟病具有限制作用的有益菌株。但是目前的生物防治

2、并沒有良好方法應(yīng)用于生產(chǎn)，為進(jìn)一步尋求有效的防治方法，本次試驗(yàn)進(jìn)行了拮抗青枯菌的篩選和鑒定。為獲得良好的防治姜瘟病的方法，產(chǎn)生與擴(kuò)大生姜的產(chǎn)量，筆者在結(jié)合前人研究的經(jīng)驗(yàn)根本之上，擬安徽省生姜種植區(qū)的發(fā)病植株根際和健康姜的根際土中分離和篩選對(duì)姜瘟青枯菌有拮抗作用的根際促生菌，在對(duì)其拮抗性質(zhì)進(jìn)行初步研究的基礎(chǔ)上，連系形態(tài)、培養(yǎng)特性，生理生化特征的鑒定以及16SrRNA的種屬特異性序列分析等方法，對(duì)篩選到的拮抗菌株進(jìn)行分類鑒定，從而對(duì)姜瘟病的

3、生物防治提供經(jīng)濟(jì)有效的功能型菌株，為姜瘟病防治上奠定一定的理論基礎(chǔ)，主要研究如下:
　　(1)通過(guò)稀釋涂布平板法于高氏、解磷和固氮三種選擇性培養(yǎng)基上篩選和分離拮抗菌，最終于固氮培養(yǎng)基中篩選到兩株拮抗菌，分別為N3和N5。隨后將兩株固氮拮抗菌進(jìn)行生長(zhǎng)競(jìng)爭(zhēng)試驗(yàn)以檢測(cè)其拮抗能力，發(fā)現(xiàn)N3菌株對(duì)姜瘟病具有較好的拮抗效果，拮抗能力為二級(jí)，能夠有效的抑制姜瘟病青枯致病菌的發(fā)育生長(zhǎng);而N5菌株對(duì)姜瘟病青枯病的拮抗效果一般，拮抗能力為一級(jí)，較N3

4、菌株拮抗姜瘟病效果弱。
　　(2)將篩選到的固氮菌株N3和N5進(jìn)行形態(tài)特征以及生理生化特性的鑒定，通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn):產(chǎn)吲哚乙酸上，N3菌株總體產(chǎn)吲哚乙酸高于N5菌株，在姜瘟病拮抗菌中定植于生姜中，可以較N5菌株更好的促進(jìn)植物生長(zhǎng);在溶磷能力上，N3菌株總體溶磷活力相對(duì)高于N5菌株，拮抗于生姜中可以更好的融合土壤中磷離子結(jié)合形成化合物，不易流失，預(yù)防土壤病害;在產(chǎn)鐵載體能力上，N3菌株總體產(chǎn)鐵載體能力也略高于N5菌株，可以很好的結(jié)合鐵色