利用SSR分子標(biāo)記輔助德育轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉.pdf

1、本研究以轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉品系JR-1為外源Bt基因的供體親本，以綜合性狀優(yōu)良的B11和荊I5為受體親本，建立兩個回交群體，利用卡那霉素鑒定和PCR擴(kuò)增鑒定目的基因，利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)和田間表型進(jìn)行背景選擇，以期獲得具有外源Bt基因(Cry1Ab/Ac)、農(nóng)藝性狀優(yōu)良的抗蟲棉純合株系。主要研究結(jié)果如下：
　　 ⑴對兩組合的BC2F1群體利用卡那霉素篩選標(biāo)記進(jìn)行前景選擇，結(jié)果表明，兩個組合BC2F1群體卡那霉素抗性植株與非抗性植

2、株的分離比例經(jīng)卡方測驗，結(jié)果為0.12和0.15(P＞0.05)，符合孟德爾分離定律?；亟蝗后w中抗卡那霉素的植株，與NPTⅡ的PCR擴(kuò)增檢測結(jié)果相吻合。在兩組合BC2F3代抗卡那霉素純合株系中，用特異性引物擴(kuò)增出抗蟲基因Cry1Ab/Ac片段。
　　 ⑵從組合B11×JR-1中選出的3個抗蟲純合株系，遺傳背景接近受體品種B11，遺傳背景回復(fù)率為91.94％～96.77％，平均遺傳背景回復(fù)率為94.09％，比理論回復(fù)率高6.59個

3、百分點。從組合荊I5×JR-1中選出的4個抗性純合株系，遺傳背景回復(fù)率介于93.55％～96.77％，平均遺傳背景回復(fù)率為95.16％，比理論值高7.66個百分點。兩組合7個中選抗性純合株系的遺傳背景回復(fù)率都明顯高于理論值，說明利用分子標(biāo)記輔助選擇可以盡快選擇到遺傳背景回復(fù)率較高的株系。
　　 ⑶組合B11×JR-1的3個中選株系與B11相比，在纖維品質(zhì)上沒有顯著差異，不同株系在產(chǎn)量、鈴重和單鈴重性狀上有顯著差異，有的優(yōu)于受體親

4、本，有的差于受體親本。組合荊I5×JR-1的4個中選株系與受體親本荊I5相比，在產(chǎn)量上沒有顯著差異，但個別株系在衣分、馬克隆值和伸長率等指標(biāo)上有顯著差異?？偟膩碚f，7個中選株系中只有個別株系在少數(shù)性狀上與輪回親本有顯著差異，說明這些回交改良株系在大部分性狀上已經(jīng)和輪回親本具有較高的一致性了。
　　 ⑷兩個組合的7個中選株系與各自的輪回親本相比，產(chǎn)量和產(chǎn)量構(gòu)成因素、纖維品質(zhì)等方面的表現(xiàn)變異方向不定，以分子標(biāo)記計算的遺傳背景回復(fù)率的

5、高低不能直接反應(yīng)農(nóng)藝性狀、纖維品質(zhì)的優(yōu)劣。因此在育種實踐中，不能僅僅依靠分子標(biāo)記輔助的背景選擇，還要結(jié)合植株的田間表現(xiàn)來提高選擇效果。
　　 ⑸對7個中選株系進(jìn)行室內(nèi)抗蟲性鑒定結(jié)果顯示，抗蟲純合株系棉葉對棉鈴蟲的抗性死亡率低于供體親本JR-1，除A4-4的幼蟲死亡率低于感蟲對照B11外，其余的株系的幼蟲死亡率均高于各組合的感蟲對照;大部分中選株系對棉鈴蟲的抗性表現(xiàn)屬低抗類型，僅組合B11×JR-1的B22-1的抗性表現(xiàn)接近供體親