苦豆子內(nèi)生放線菌資源及其生防作用評(píng)價(jià).pdf

1、植物內(nèi)生放線菌普遍存在于目前發(fā)現(xiàn)的各種陸生及水生植物中，其多樣性受多種因素的影響。不同的區(qū)域或位點(diǎn)、氣候條件、植被等均可影響內(nèi)生放線菌類群的多樣性。研究發(fā)現(xiàn)，藥用植物中蘊(yùn)含著大量的有益內(nèi)生放線菌，這些內(nèi)生放線菌與宿主之間具有緊密的生態(tài)關(guān)系，其產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物在醫(yī)藥、植物病蟲害生物防治等方面的用途逐漸增大，成為尋找新的天然活性產(chǎn)物的重要方向。本文以寧夏干旱荒漠區(qū)重要的沙生藥用植物苦豆子為研究對(duì)象，進(jìn)行了內(nèi)生放線菌的分離鑒定、多樣性分析、

2、高活性菌株的篩選及16S rRNA基因序列同源性分析，并對(duì)其生防作用作出評(píng)價(jià)。研究結(jié)果如下:
　　 1、從寧夏靈武白芨灘國家級(jí)自然保護(hù)區(qū)不同土壤類型、不同優(yōu)勢(shì)植被的6個(gè)樣區(qū)采集的健康苦豆子中，分離得到158株內(nèi)生放線菌。同一植株不同組織中，內(nèi)生放線菌數(shù)量以根部最多，其次為種子，葉部最少;淡灰鈣土中苦豆子內(nèi)生放線菌數(shù)量比風(fēng)沙土中多;鑒定結(jié)果表明:內(nèi)生放線菌以鏈霉菌屬和諾卡氏菌屬較多，其中鏈霉菌屬以白孢類群為主。
　　 2、

3、采用透明圈法對(duì)126株苦豆子內(nèi)生放線菌進(jìn)行分泌胞外酶活性檢測(cè)，有71株內(nèi)生放線菌具有酶活性，占總菌株數(shù)的56.3％。有8株菌株酶活性最為顯著，其中菌株NDZKDS73、NDZKDS7對(duì)淀粉酶活性最高，透明圈半徑達(dá)到24.62和19.12mm;菌株FJYKDS5對(duì)蛋白酶活性高，透明圈半徑16.94mm;菌株FJYKDS11、BJGKDS2對(duì)纖維素酶活性最高，透明圈半徑為24.72和22.40mm;菌株FJJKDS2對(duì)幾丁質(zhì)酶活性最高，透明

4、圈半徑17.76mm;菌株NDZKDS24、NDZKDS20對(duì)葡聚糖酶活性最高，透明圈半徑為12.06和10.50mm。通過形態(tài)特征和16S rRNA基因序列同源性分析，有7株活性菌株屬鏈霉菌屬(Streptomyces)，1株屬擬諾卡氏菌屬(Nocardiopsis)。
　　 3、以6種植物病原真菌為靶標(biāo)菌采用皿內(nèi)對(duì)峙法對(duì)126株苦豆子內(nèi)生放線菌進(jìn)行了抗菌活性篩選，15株菌具有較高的抑菌活性（占11.9％）。其中菌株YWZKD

5、S4對(duì)稻瘟病病菌的抑菌圈半徑最大達(dá)到15.12mm; NDZKDS65對(duì)黃瓜枯萎病菌的抑菌圈半徑最大達(dá)到18.54mm;菌株NDZKDS22具有廣譜抗菌活性。根據(jù)菌株形態(tài)特征和16S rRNA序列分析，將3株菌株歸入鏈霉菌屬，菌株YWZKDS4、NDZKDS22、NDZKDS65分別與Streptomyces scabiei、Streptomyces albospinus和Streptomyces capillispiralis親緣關(guān)系

6、最近，序列相似性分別為99.1％、96.4％和98.8％。
　　 4、選取28株苦豆子內(nèi)生放線菌的代表菌株，對(duì)其分泌生長(zhǎng)素(IAA)的能力和抑制雜草種子萌發(fā)的活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:1株菌株NDZKDS1顯色反應(yīng)為粉紅色，分泌生長(zhǎng)素的能力較強(qiáng);3株菌株YCZKDS3、FJJKDS19、NDZKDS22的發(fā)酵液對(duì)雜草種子的萌發(fā)有明顯的抑制效果。通過形態(tài)特征和16S rRNA基因序列同源性分析，1株具有分泌IAA能力的菌株屬擬諾卡氏