野生植物內(nèi)生放線菌的篩選研究.pdf

1、為了尋找具有內(nèi)生習(xí)性的植病生防放線菌，本研究采集秦嶺自然保護(hù)區(qū)14種野生植物分離內(nèi)生放線菌，對獲得菌株進(jìn)行非寄主植物體內(nèi)的定殖、離體皿內(nèi)抑菌活性、發(fā)酵條件優(yōu)化、生物學(xué)習(xí)性和溫室防病促生等方面的系統(tǒng)研究，并對菌株SG2進(jìn)行鑒定。從而為我們現(xiàn)有生防菌株的人工改良和新生防制劑的開發(fā)提供菌源。 本研究從采集的14種野生植物中分離獲得29株內(nèi)生放線菌，其中石竹(Dianthuschinensis)和野大豆野大豆(Glycine soja)

2、分離得內(nèi)生放線菌較多。植物不同組織中以根部獲得的內(nèi)生放線菌最多，其次為葉部和莖部。不同培養(yǎng)基的分離效果有一定差異，不同方法處理樣品后的分離效果也有差別，其中用S培養(yǎng)基分離得到的內(nèi)生放線菌最多，不同處理方法中以組織塊法獲得的菌株數(shù)明顯高于組織研磨得到的菌株數(shù)。 通過在非寄主植物體內(nèi)的定殖研究，進(jìn)一步證實(shí)分離得到的放線菌均是植物內(nèi)生放線菌，而且這些菌株能夠在與宿主植物不同科、不同屬的植物體內(nèi)定殖能力。 皿內(nèi)抑菌活性測定，發(fā)現(xiàn)

3、6株內(nèi)生放線菌表現(xiàn)出較高的抑菌活性。其中，菌株SF20對灰葡萄孢的抑制率達(dá)到88.0％。菌株SG2的發(fā)酵濾液對番茄早疫病菌的抑菌圈直徑達(dá)到3.5mm。菌株SG2的SNB發(fā)酵濾液與靶標(biāo)菌的孢子懸浮液按照體積2∶1比例混合，對灰葡萄孢、大麗輪枝菌、番茄早疫病菌、西瓜枯萎菌和番茄葉霉病菌孢子萌發(fā)抑制率均達(dá)100％。 對菌株SG2的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，確定其最佳發(fā)酵條件為：以葡萄糖和黃豆粉為碳氮源，50mL·250mL<'-1>的裝液量，

4、10％的接種量，初始pH7.0，在26℃條件下，培養(yǎng)7d。正交試驗(yàn)確定菌株SG2的最適水平為A281C1，即發(fā)酵時間為7d，發(fā)酵溫度為26℃，接種量10％為最佳。 生物學(xué)習(xí)性研究結(jié)果表明，6株內(nèi)生放線菌對黃瓜、番茄和黃豆3種植物的發(fā)芽均有一定的影響。菌株SF4和菌株SF20的孢子懸浮，菌株SFl9的發(fā)酵液可以促進(jìn)3種植物的胚根、胚芽以及植株生長。菌株SF20和菌株SF4的發(fā)酵液還可以提高黃瓜和番茄葉片葉綠素含量。 溫室防