一種新型白消安制備精原干細(xì)胞移植受體方法對(duì)小鼠生殖及生理功能的影響.pdf

1、精原干細(xì)胞(SSCs)是維持雄性生殖能力的重要資源，也是精子發(fā)生的基礎(chǔ)。精原干細(xì)胞移植為研究精子發(fā)生、雄性生殖能力及新型轉(zhuǎn)基因技術(shù)奠定了基礎(chǔ)。受體制備是SSCs移植技術(shù)的重要組成部分，也是SSCs成功移植的必要條件和前提基礎(chǔ)，受體制備效率直接關(guān)系到移植效果。因操作方法簡(jiǎn)便，腹腔注射白消安一直是本研究領(lǐng)域中一種較為常用的方法，但白消安的副作用較大，嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起動(dòng)物死亡，影響了該方法的臨床應(yīng)用與發(fā)展。本研究通過直接向小鼠靶器官睪丸注射白消安

2、來制備受體，同時(shí)以傳統(tǒng)的腹腔注射作為對(duì)照，以50％ DMSO睪丸注射作為空白對(duì)照，觀察經(jīng)不同途徑給藥后各組小鼠在不同時(shí)間點(diǎn)各項(xiàng)生殖生理指標(biāo)（死亡率、體重和睪丸重、血象、精子數(shù)、曲細(xì)精管、GDNF、生育能力）的變化情況，分析不同給藥途徑對(duì)受體制備效果的影響。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)睪丸給藥的小鼠沒有出現(xiàn)死亡，而經(jīng)腹腔給藥后三組小鼠分別出現(xiàn)18％、39.3％、42.7％的死亡率。檢測(cè)小鼠血常規(guī)發(fā)現(xiàn)，腹腔對(duì)照組小鼠除平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度

3、(MCHC)無明顯變化外，紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、血紅蛋白數(shù)(HGB)、白細(xì)胞(WBC)、血小板(PLT)均明顯下降。而睪丸注射各組小鼠的RBC、HGB、MCHC均未發(fā)生明顯變化，WBC、PLT數(shù)有所下降，但下降程度比腹腔對(duì)照組小，且各項(xiàng)血液指標(biāo)均較快恢復(fù)到正常水平。40mg/kg劑量腹腔注射和6、8、10mg/kg劑量睪丸注射能夠使受體曲細(xì)精管完全中空，而4mg/kg劑量不能使受體睪丸曲細(xì)精管內(nèi)的生精細(xì)胞完全耗竭。雖然8mg/kg和10m

4、g/kg劑量睪丸注射能夠使曲細(xì)精管完全中空，但會(huì)造成睪丸硬化，恢復(fù)緩慢，甚至不能恢復(fù)。精子數(shù)、相對(duì)睪丸重量、GDNF水平會(huì)隨著曲細(xì)精管內(nèi)的變化發(fā)生相應(yīng)改變。此外，經(jīng)腹腔和睪丸注射白消安均會(huì)造成小鼠的短期不育，但這種不孕均可恢復(fù)，且睪丸注射比腹腔注射恢復(fù)速度更快。白消安在一定時(shí)期內(nèi)雖然會(huì)對(duì)小鼠的生育能力造成影響，但不影響其后代性別比例。
　　 本研究以小鼠為模型，證明了雙側(cè)睪丸注射白消安對(duì)動(dòng)物機(jī)體毒害作用顯著低于腹腔注射，可以用于