駱駝瘤胃內(nèi)纖維素降解菌的選育.pdf

1、纖維素是自然界中最為豐富的可再生天然高分子資源，利用生物酶解法對其降解已成為各國研究領(lǐng)域中比較熱門的研究課題。反芻動物瘤胃內(nèi)的微生物對纖維素有著獨(dú)特的降解機(jī)制，使得纖維素酶活較高的瘤胃微生物備受矚目。因此選育出瘤胃內(nèi)優(yōu)良纖維素降解菌對反芻動物有效利用粗纖維物質(zhì)具有重要的意義。
　　本實(shí)驗(yàn)以內(nèi)蒙古地區(qū)駱駝瘤胃內(nèi)容物為來源，通過以秸稈唯一碳源的選擇性培養(yǎng)基和纖維素剛果紅鑒別性培養(yǎng)基進(jìn)行初篩和復(fù)篩，再經(jīng)纖維二糖液體和固體培養(yǎng)基對其進(jìn)行富

2、集和傾注培養(yǎng)，根據(jù)菌落和菌體形態(tài)，將表型特征極為相似的菌株進(jìn)行歸納總結(jié)，綜合篩選出11株菌。在此基礎(chǔ)上繼續(xù)選育，淘汰了3株劣勢菌體。對剩余8株纖維素降解菌再次分別進(jìn)行粗纖維分解能力大小測定和分泌纖維素酶胞外酶、胞內(nèi)酶的測定。排除實(shí)驗(yàn)誤差以及其他不確定因素后，從8株菌種中選出降解纖維素能力較強(qiáng)的1＃、2＃，以及纖維素胞外酶酶活較高的8＃、17＃作為優(yōu)勢菌株，另外選擇15＃作為參照菌株，根據(jù)經(jīng)典微生物學(xué)鑒定方法對選育的優(yōu)勢菌株進(jìn)行生理生化以

3、及分子生物學(xué)鑒定。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:1.駱駝瘤胃內(nèi)分離到的纖維素降解菌主要以桿菌為主，且多數(shù)為兼性厭氧菌，只有一株菌為嚴(yán)格厭氧菌，駱駝瘤胃內(nèi)降解纖維素的菌株以桿狀兼性厭氧菌為主。2.桿菌分解粗纖維的能力要優(yōu)于球菌。3.8＃、17＃菌株恒定分泌纖維素酶胞外酶，且活性高于其他菌株。4.五株纖維素降解菌分別為:1＃Rummeliibacillus stabekisii、2＃產(chǎn)酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)、8＃K