谷子中與頂端優(yōu)勢(shì)相關(guān)基因PF40的克隆及功能研究.pdf_第1頁(yè)
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1、以谷子授粉后5d、7d和12d的未成熟種子為材料,提取總RNA并富集mRNA,構(gòu)建了谷子未成熟種子的cDNA表達(dá)文庫(kù),文庫(kù)容量為2×10<'7>pfu/ml.采用SB401原核表達(dá)蛋白質(zhì)制備抗血清,利用抗原-抗體反應(yīng)篩選cDNA表達(dá)文庫(kù).對(duì)篩選得到的6個(gè)陽(yáng)性克隆PF11、PF14、PF17、PF40、PF52進(jìn)行序列測(cè)定、GenBank+EMBL+DDBL數(shù)據(jù)庫(kù)同源序列查詢(xún),結(jié)果PF11與脂轉(zhuǎn)移蛋白基因同源性為72﹪,PF14與半胱氨酸

2、合成酶基因同源性為78﹪,PF17與過(guò)氧化物酶基因同源性為81﹪,PF27與20S蛋白酶體PAC1基因同源性為83﹪,PF40與擬南芥中功能未知的AT3g20870/MOE17-16 mRNA同源性為51﹪,PF52未發(fā)現(xiàn)同源基因.對(duì)PF40基因進(jìn)行進(jìn)一步研究.PF40基因由1274個(gè)核苷酸組成,推測(cè)其編碼的蛋白質(zhì)含有277個(gè)氨基酸,分子量為29445Da.生物學(xué)軟件分析結(jié)果表明,PF40蛋白的疏水區(qū)域占優(yōu)勢(shì),肽鏈上有多個(gè)可以被磷酸化、

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