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文檔簡介
1、利用5'RACE和3'RACE方法從辣椒中克隆到CTOM1基因,其全長cDNA共1244個堿基對,編碼一個由282個氨基酸組成的六次跨膜蛋白.CTOM1與擬南芥TMV寄主因子基因AtTOM1在核苷酸水平有65.2％的同源性,在氨基酸水平上有74.9%的同源性;與番茄CMV寄主因子基因TTOM1在核苷酸水平上有81.7%的同源性,在氨基酸水平上有91.7%的同源性,表明CTOM1很可能也是辣椒RNA病毒的寄主因子基因.構(gòu)建了研究該基因功能
2、的三種質(zhì)粒:基于CTOM1基因的近5'端序列的反義RNA植物表達(dá)質(zhì)粒;基于CTOM1全長cDNA的pTV00:CTOM1病毒表達(dá)質(zhì)粒和基于CTOM1 cDNA片段的RNAi表達(dá)質(zhì)粒.用三親結(jié)合方法將上述質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌,并用于轉(zhuǎn)化辣椒"天等一號"和"桂研99"外植體,獲得轉(zhuǎn)CTOM1 RNAi表達(dá)質(zhì)粒陽性"天等一號"轉(zhuǎn)基因植株22株、轉(zhuǎn)CTOM1反義RNA載體抗卡那霉素小苗12株和轉(zhuǎn)CTOM1反義RNA質(zhì)粒的"桂研99"抗卡那霉素小苗19
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