DEV基因文庫構(gòu)建、核衣殼蛋白基因的發(fā)現(xiàn)及克隆與表達(dá).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以DEVCHv株為基本材料，對該毒株進行了提純研究和基因組酶切分析；構(gòu)建了DEV基因文庫，經(jīng)比對發(fā)現(xiàn)并克隆、鑒定了其核衣殼蛋白基因；利用該基因片段設(shè)計引物，建立了基于DEV核衣殼蛋白基因的一種PCR檢測方法；同時將該基因克隆到原核表達(dá)載體pET32a中，對其進行了表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物抗原性的研究。主要內(nèi)容包括：　　1.比較了四種方法對DEVChv株的提純效果，并對病毒結(jié)構(gòu)蛋白進行了初步分析?！　?.對DEVCHv株基因組DNA進行

2、了限制性核酸內(nèi)切酶分析：通過DEF增殖DEVCHv株后，比較了兩種方法對DEV基因組DNA的提取效果?！　?.構(gòu)建了DEV基因文庫，發(fā)現(xiàn)了DEV核衣殼蛋白基因并進行了克隆與鑒定?！　?.利用針對DEV核衣殼蛋白基因的一對引物(擴增跨度為1013bp,含完整的DEV衣殼蛋白基因)對DEV強毒CHv株和弱毒CHa株基因組DNA進行擴增，獲得了與預(yù)期大小相符合的特異性條帶，成功建立了檢測DEV衣殼蛋白基因的PCR方法。　　5.成功構(gòu)建了

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