1483.microrna在果蠅toll信號免疫響應中的調控作用研究

1、索取號：QZ亙曼：!Z：!!≥fJIJlIJIIIJlllllllllIIllJIIfY3310396南京師勉犬掌博士學位論文凰microRNA在果蠅Toll信號免疫響應中的調控作用研究研究生：指導教師：李盛杰許曉風教授馬飛教授培養(yǎng)單位：生命科學學院一級學科：二級學科：完成時間：答辯時間：生物學動物學2017年2月28日2017年5月20日摘要摘要果蠅(Drosophilamelanogaster)作為重要的模式動物，其便捷的遺傳可操作

2、性、完備的基因組注釋以及豐富的突變株種類，為研究果蠅免疫穩(wěn)態(tài)的調控機制提供了極大的便利，也為研究昆蟲天然免疫與人類天然免疫之間的關系架起了橋梁。果蠅先天免疫響應主要包括兩個不同的信號通路：Toll和Imd信號通路，這兩個信號通路分別與哺乳動物先天免疫應答過程中的TLR信號通路和TNF一值信號通路具有同源性，表明果蠅與哺乳動物在先天免疫調控途徑上存在著共同的進化起源。因此，深入開展果蠅免疫調控機制的研究，為進一步揭示其他昆蟲抗病原菌感染的

3、作用機制，以及闡明哺乳動物先天性免疫的調控機制等都具有重要的理論和實踐意義。microRNA(miRNA)是與轉錄后基因沉默相關的一類長度為21—25nt的非編碼小RNA，在基因表達調控以及維持生物體內穩(wěn)態(tài)過程中都起著極其重要的作用。當免疫應答被過度激活或不足時，將會對生物個體造成不同程度的損傷。因此，生物體必須具備相應的保護機制來維持免疫穩(wěn)態(tài)，以防止免疫應答因過度或不足所造成的傷害。果蠅T011信號通路作為果蠅免疫應答的重要通路之一，

4、其調控過程必定是一個十分精細的過程，涉及的調控因子可能既有各種信號通路蛋白、轉錄因子，亦有多種miRNA參與其中。然而，目前有關miRNA在果蠅Toll信號通路中的調控作用范圍及調控作用機制仍不十分清晰，需作進一步的深入研究。為此，本論文圍繞miRNA在果蠅Toll信號通路中的調控機制這一重要科學問題，開展了較為系統(tǒng)的研究工作：1利用smallRNA—seq技術，考察了革蘭氏陽性菌藤黃微球菌(Mluteus)感染野生型果蠅(W1118)

5、3h、12h和24h后的果蠅及未感染的野生型果蠅(W1118，對照)的miRNA表達情況，共計鑒定出445個果蠅miRNA；感染Mluteus3h和12h后的果蠅與對照組果蠅比較，分別出現(xiàn)了6和14個差異表達的miRNA，而感染24h后的果蠅差異表達的miRNA數(shù)量則顯著增加到86個。2為了對潛在的免疫應答相關的miRNA進行篩選和鑒定，利用果蠅全身高表達系統(tǒng)Gal80t5tubGal4，構建了41株UAS—miRNAlines果蠅高表