大腸桿菌F18菌毛FedE亞單位單克隆抗體的制備及鑒定.pdf

1、揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文大腸桿菌F18菌毛FedE亞單位單克隆抗體的制備及鑒定姓名：呂玲申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：徐建生20050501呂玲大腸桿菌F18菌毛Fedg亞單位單克隆抗體的制備及鑒定大腸桿菌F18菌毛FedE亞單位單克隆抗體的制備及鑒定研究生：呂玲導(dǎo)師：徐建生副教授專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)中文摘要斷奶仔豬水腫病或腹瀉病是由表達(dá)F18菌毛的人腸桿菌引起的仔豬常見的傳染病，在養(yǎng)豬、『k的生產(chǎn)中具有重要的影響。F18菌毛分為

2、兩個血清型變種F18ab和F18ac，分別介導(dǎo)產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)和產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素大腸桿菌(VTEC)在仔豬腸道里的定居，進(jìn)而繁殖導(dǎo)致相應(yīng)的病理變化。F18菌毛蛋白結(jié)構(gòu)主要有五個部分：A、B、c、E、F。其中A亞單位是菌毛的主要結(jié)構(gòu)弧單位構(gòu)成菌毛的主干，B、C亞單位在菌毛的成熟，裝配及合成中起伴侶或推進(jìn)作用，F(xiàn)亞單位是菌毛的黏附單位，E亞單位是否與黏附有關(guān)還不清楚。本研究通過利用重組蛋自fGST—VedF0帶U備的免疫抗原，

3、免疫BALB／c小鼠，利用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，采用問接ELISA篩選出兩株穩(wěn)定分泌針對FedE亞單位的犖克隆抗體D5，E2，ELISA效價分別為121092，141092。通過間接免疫熒光試驗(yàn)和小腸上皮細(xì)胞黏附阻抑試驗(yàn)，結(jié)果表明抗FedE單抗具有識別F18天然菌毛的生物活性，可以用于實(shí)際檢測，但是不能阻斷F18細(xì)菌對小腸上皮細(xì)胞的黏附，進(jìn)而推斷此亞單位不是F18菌毛的黏附功能單位。關(guān)鍵詞：豬水腫?。焊篂a??；F18菌毛；單克隆抗體：免疫熒