氣腫疽梭菌單克隆抗體的制備及鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、氣腫疽(Clostridium chauvoei)又稱黑腿病，是由氣腫疽梭菌引起的反芻動物的急性、發(fā)熱性傳染病。該病主要呈散發(fā)或地方性流行，廣泛分布于自然界。在一定條件下，可引起機體嚴重的疾病，給畜牧養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經濟損失。而針對該病的快速檢測技術卻很少。迅速、準確地診斷疾病是防治該菌感染的關鍵。因此，本實驗利用滅活的標準氣腫疽梭菌C54-1為抗原免疫6-8周齡的雌性BALB/c小鼠，采用傳統(tǒng)的雜交瘤技術，經間接ELISA和有限稀釋法

2、篩選和克隆后，獲得了一株能穩(wěn)定分泌氣腫疽梭菌單克隆抗體的雜交瘤細胞系，并命名為3B7。對制備的1株（3B7）雜交瘤細胞進行間接ELISA法及Western blotting特異性鑒定，用單抗隆抗體亞類鑒定試劑盒鑒定其MAb亞型，用常規(guī)方法進行染色體分析和腹水抗體的效價測定。特異性試驗結果顯示，MAb只與氣腫疽梭菌發(fā)生反應，與腐敗梭菌、產氣莢膜梭菌（A、B、C、D、E型）、大腸桿菌O:157、沙門氏菌045-2(D群)、布魯氏菌M5-90

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