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文檔簡(jiǎn)介
1、 本文對(duì)植酸酶基因的克隆及轉(zhuǎn)化玉米進(jìn)行研究,通過(guò)比較愈傷組織誘導(dǎo)和分化培養(yǎng)的結(jié)果,選用誘導(dǎo)結(jié)果較好,分化率相對(duì)較高的玉米基因型作為受體材料。通過(guò)大量試驗(yàn)得到本研究中影響農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米的最佳因素。構(gòu)建了植酸酶基因植物表達(dá)載體pCAMBIA1301-phyA和pBI121-phyA。優(yōu)化了影響農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米的條件。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化玉米愈傷組織,將植酸酶基因轉(zhuǎn)到玉米愈傷組織中,通過(guò)篩選及抗性培養(yǎng),獲得了抗性玉米愈傷組織及抗性玉米苗。研究
2、工作獲得以下結(jié)果: 1.首次利用PCR從米曲霉中克隆植酸酶基因并測(cè)序。 2.首次將植酸酶基因在GeneBank注冊(cè),注冊(cè)號(hào)為GI:47176935。 3.首次構(gòu)建了來(lái)自米曲霉植酸酶基因的畢赤酵母(Pichia pastoris)表達(dá)載體PIC9K-phyA和植物表達(dá)載體pCAMBIA1301和pBI121-phyA。 4.首次將來(lái)自米曲霉植酸酶基因在畢赤酵母中表達(dá),篩選到多拷貝的畢赤酵母轉(zhuǎn)化子,并測(cè)定植酸
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