包埋脫水法超低溫保存海帶雌、雄配子體的研究.pdf

1、以海帶日長雌、雄配子體(gametophytesofLaminariajaponicaAresch)為試驗(yàn)材料，用包埋脫水法進(jìn)行超低溫冰凍保存。將海帶雌、雄配子體分別打碎成小段后包埋在3％褐藻酸鈣膠球中，經(jīng)過蔗糖預(yù)培養(yǎng)一段時(shí)間，再用硅膠吸濕法脫水后，進(jìn)行保存。探討了蔗糖濃度和預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、脫水速率、膠球含水量對超低溫保存存活率的影響；保存后配子體的發(fā)育情況，結(jié)果表明： 1.蔗糖濃度和預(yù)培養(yǎng)時(shí)間對海帶雌、雄配子體超低溫保存存活率的影

2、響 蔗糖預(yù)培養(yǎng)對雌、雄配子體冰凍前后存活率的影響較大。雌、雄配子體的最佳預(yù)培養(yǎng)條件不同，雌配子體在蔗糖濃度0.4mol/L預(yù)培養(yǎng)9h，存活率達(dá)45.9％；雄配子體在蔗糖濃度0.3mol/1預(yù)培養(yǎng)9h，存活率達(dá)29.7％。 2.脫水速率對海帶雌、雄配子體超低溫保存存活率的影響 包埋后，分別以不同脫水速率(1％、5％、8％、10％、12％、15％、20％含水量/h)脫水，結(jié)果雌、雄配子體都在10％含水量/h的脫水速率

3、獲得最高存活率，分別為49.8％和34.6％。 3.膠球含水量對海帶雌、雄配子體超低溫保存存活率的影響 膠球含水量對脫水過程的存活率影響不大，但對冰凍保存的存活率影響很大。雌、雄配子體的最佳含水量都是40％，冰凍后存活率分別為49.6％和34.2％。 4.超低溫冰凍保存前后海帶配子體發(fā)育情況 鏡檢觀察，經(jīng)過超低溫保存后的海帶配子體，在與冰凍保存前的材料相同的條件下培養(yǎng)，可以發(fā)育成幼孢子體，形態(tài)與保存前的對