兩種紫菜超低溫保存方法的研究.pdf

1、本文以條斑紫菜(PorphyrayezoensisUeda03B)自由絲狀體和壇紫菜(Porphyrahaitanensis)自由絲狀體為實(shí)驗(yàn)材料，分別用包埋脫水法和包埋-玻璃化法對(duì)兩種材料進(jìn)行了超低溫(-196℃)保存研究。 (一)條斑紫菜自由絲狀體的包埋脫水法超低溫保存在條斑紫菜自由絲狀體的包埋脫水法保存中，將絲狀體包埋在含有3﹪褐藻酸鈣的膠球中，經(jīng)硅膠吸濕法脫水后，探討了脫水速率、含水量及化凍后恢復(fù)方法對(duì)冰凍保存存活率的影

2、響。結(jié)果表明： 1.脫水速率對(duì)存活率的影響包埋后，分別以7.5﹪、10﹪、12.5﹪、15﹪、20﹪的平均脫水速率(﹪含水量/h)進(jìn)行脫水，結(jié)果絲狀體在15﹪含水量/h的較高脫水速率下獲得最高存活率。 2.含水量對(duì)存活率的影響以15﹪含水量/h的脫水速率進(jìn)行脫水，至膠球含水量分別為鮮重的10﹪、15﹪、20﹪、25﹪、30﹪、40﹪和50﹪，結(jié)果膠球含水量為鮮重的15﹪的時(shí)候獲得了最大存活率。 3.化凍后恢復(fù)方法

3、對(duì)存活率的影響化凍后，條斑紫菜03B的絲狀體在培養(yǎng)基中室溫暗放置24h后存活率最高；條斑紫菜03C的絲狀體在培養(yǎng)基中室溫下暗放置6h后存活率最高。 (二)壇紫菜自由絲狀體的包埋-玻璃化法超低溫保存在壇紫菜的包埋-玻璃化法保存中，將絲狀體包埋在含有3﹪褐藻酸鈣的膠球中，用25﹪PVS(玻璃化保護(hù)液)溶液裝載后，用100﹪PVS溶液進(jìn)行脫水處理，探討了PVS處理時(shí)間、裝載液處理時(shí)間以及復(fù)溫后不同洗滌液對(duì)存活率的影響。結(jié)果表明：

4、 1.PVS處理時(shí)間對(duì)存活率的影響包埋后，用100﹪PVS溶液對(duì)膠球進(jìn)行脫水處理，處理時(shí)間分別為2min、5min、10min、20min、30min，結(jié)果處理5min的絲狀體存活率最高，為20.3﹪。 2.裝載液處理時(shí)間對(duì)存活率的影響將包埋后的膠球用25﹪PVS溶液裝載處理不同時(shí)間(5min、10min、15min、20min、30min)后，用100﹪PVS處理20分鐘，結(jié)果用25﹪PVS裝載15min后絲狀體獲得最大存活