斜帶石斑魚Sox11b cDNA的克隆、表達及功能分析.pdf

1、本文利用PCR篩庫法結合5’RACE法和3’RACE法，成功地從4齡斜帶石斑魚的卵巢cDNA文庫中篩選出一種SRY相似基因，全長為2253bp，編碼一個389個氨基酸的多肽，命名為Sox11b。氨基酸序列分析表明它的HMG區(qū)域同其它Sox11蛋白的HMG區(qū)域相差1～2個氨基酸，屬于Sox蛋白家族的C亞族成員中的Sox11蛋白；進化樹分析完整蛋白表明，它與所有魚類Sox11蛋白處于同一簇，與斑馬魚Sox11b蛋白以及虹鱒魚Sox24蛋白處

2、于同一分支。Sox11b為單拷貝基因。該基因在卵巢的mRNA全長為2.3kb。　　一步法RT-PCR結合Southern雜交表明：Sox11b除了血液未檢測到表達外，其它所有組織都有廣泛表達；在卵巢有非常高的表達量；在嗅球、前腦、后腦、下丘腦、延腦、垂體、鰓、心臟、肝臟、肌肉能檢測到表達；在中腦、腎臟、脾臟、脂肪能檢測到低的表達量；在胚胎和仔魚發(fā)育過程中，一直都有表達，且在受精卵和胚胎發(fā)育早期有較高的表達量，但在晶體期、孵化后5天、1

3、8天、33天都有出現表達量降低的現象。Northern雜交表明：在脂肪未檢測到表達；在全腦組織、脾臟可見非常低的表達；在4齡魚卵巢、2齡魚卵巢都能檢測到非常高的表達量，且4齡魚卵巢Sox11bmRNA的表達量高于2齡魚卵巢。對自然性逆轉過程的魚的性腺，進行Northern雜交和RT-PCR分析都表明，卵巢發(fā)育越好的魚，Sox11bmRNA的表達量越高，隨著性轉變?yōu)榫玻琒ox11bmRNA表達量降低。對MT人工誘導性逆轉魚的性腺，進行R