腸型放射病小鼠模型中小腸細(xì)胞死亡類(lèi)型的鑒定和修飾性p53蛋白的表達(dá)研究.pdf

1、目的:放射治療是腫瘤治療的三大主要手段之一，其中70％的惡性腫瘤可以進(jìn)行放射治療。在許多腹腔惡性腫瘤放療過(guò)程中病人會(huì)出現(xiàn)腸道癥狀，如腹瀉、消化不良等，這是放療對(duì)腸道正常細(xì)胞的損傷引起的副作用。這種副作用的存在極大地影響了放療的進(jìn)行和病人的康復(fù)。再者，目前沒(méi)有有效的藥物救治核泄漏事故中的腸型放射病。通過(guò)對(duì)照射后腸道細(xì)胞死亡形式及其機(jī)制的研究，尋找相應(yīng)的救治措施，提高對(duì)正常組織的保護(hù)，以期提高放射治療的療效和救治腸型放射病。
　　

2、方法:小鼠接受15Gy全身照射后，觀察記錄小鼠的生存，繪制生存曲線;在照后指定的時(shí)間點(diǎn)處死小鼠，取出回腸，觀察結(jié)腸糞便形成、HE染色以及透射電鏡等形態(tài)學(xué)指標(biāo);免疫熒光法分析活性氧(ROS)的水平;ELISA法測(cè)定谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)、過(guò)氧化氫(H2O2)以及超氧化物歧化酶(SOD)的水平;免疫印跡法分析Caspase-3，LC3B以及p53的磷酸化、乙酰化水平;免疫熒光法分析HMGB1;酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中的IL-6水平

3、。
　　 結(jié)果:照后小鼠回腸中活性氧明顯增加，而氧化指標(biāo)(GSH，NO，H2O2，SOD)卻沒(méi)有明顯改變。通過(guò)形態(tài)學(xué)以及生化指標(biāo)反映:在15Gy全身照射后的小鼠回腸中均顯示出凋亡、壞死以及自噬的特征。剪切的Caspase-3（凋亡標(biāo)志物）的出現(xiàn)，LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ（自噬標(biāo)志物）的轉(zhuǎn)換，血清IL-6的分泌以及HMGB1（壞死標(biāo)志物）的表達(dá)。此外，在15Gy照后出現(xiàn)p53基因379位賴(lài)氨酸的乙酰化以及第6、20、392位的絲氨酸