促紅細(xì)胞生成素對大鼠腎缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制.pdf

1、目的：本研究采用大鼠腎缺血再灌注損傷模型，探討重組人促紅細(xì)胞生成素(recombinanthumanerythropoietin，rHuEPO)對大鼠腎缺血再灌注損傷的作用，并對其可能機(jī)制進(jìn)行初步研究。 方法：雄性Wistar大鼠72只，隨機(jī)分為三組：(1)假手術(shù)組(N=24)，按取材時間不同又分為4個小組，即相當(dāng)于再灌注1h、6h、12h、24h取材組，每組6只；(2)腎缺血再灌注損傷模型組(N=24)，組內(nèi)又分為再灌注1h、

2、6h、12h、24h4個時間點，每個時間點6只；(3)rHuEPO組(N=24)，組內(nèi)又分為再灌注1h、6h、12h、24h4個時間點，每個時間點6只。將動物麻醉，開腹，假手術(shù)組切除右腎，不夾閉左腎動脈，模型組和rHuEPO處理組切除右腎，夾閉左腎動脈45min后松夾再灌，rHuEPO處理組在再灌注開始前尾靜脈注射rHuEPO3000U/Kg，假手術(shù)組和模型組在再灌注開始前尾靜脈注射等量生理鹽水。再灌注達(dá)相應(yīng)時間點時，從各小組大鼠下腔靜

3、脈取血3ml備測血尿素氮(BUN)和血肌酐(Cr)，然后迅速切除左腎，稱取0.5克腎組織迅速冷凍，待作成10％組織勻漿，測定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓過氧化物酶(MPO)，其余腎組織用10％甲醛固定，制備石蠟切片，作HE染色觀察病理變化以及作免疫組化分析腎組織P-選擇素和ICAM-1表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)腎功能改變：模型組除再灌注1h組血BUN無明顯升高外，其余各小組BUN、Cr較假手術(shù)組明顯升高(P＜0.

4、01)，rHuEPO處理組除再灌注1h組BUN與假手術(shù)組無明顯差異外，其余各小組BUN較相應(yīng)時間點假手術(shù)組明顯升高(P＜0.05,P＜0.01)，rHuEPO處理組中再灌注1h,12h,24h組血Cr較假手術(shù)組明顯升高(P＜0.05，P＜0.01)，而再灌注6h組血Cr與假手術(shù)組無顯著差異。與腎IRI模型組比較，rHuEPO處理組再灌注6h、12h、24h組BUN、Cr明顯降低(P＜0.01，P＜0.05)，rHuEPO處理后再灌注1h

5、組血BUN和Cr與模型組無明顯差異。(2)腎組織生化指標(biāo)檢測結(jié)果：腎組織MDA、SOD測定結(jié)果：與假手術(shù)組比較，模型組各組腎組織MDA含量均明顯升高(P＜0.05,P＜0.01)，而各組腎組織SOD活力均顯著降低(P＜0.05,P＜0.01)，rHuEPO處理組除再灌注24h組MDA含量較假手術(shù)組顯著升高外(P＜0.01)，其余各小組腎組織MDA含量與假手術(shù)組都無明顯差異，rHuEPO處理組中再灌注6h，12h，24h組腎組織SOD活力

6、較假手術(shù)組明顯降低(P＜0.05)，再灌注1h組腎組織SOD活力與假手術(shù)組無明顯差異。與腎IRI模型組比較，除rHuEPO處理后再灌注1h組腎組織MDA含量和SOD活力與相應(yīng)時間點模型組無差異外，其余各rHuEPO處理小組腎組織MDA含量較同一時間點模型組明顯降低(P＜0.05,P＜0.01)，而腎組織SOD活力較各對應(yīng)時間點模型組明顯升高(P＜0.05,P＜0.01)。腎組織MPO活性檢測結(jié)果：模型組各組腎組織MPO活性較假手術(shù)組明顯

7、升高(P＜0.01)，rHuEPO處理后再灌注6h，24h組腎組織MPO活性較同一時間點假手術(shù)組明顯升高(P＜0.01)，而rHuEPO處理后再灌注1h，12h組腎組織MPO活性與假手術(shù)組無明顯差異；與腎IRI模型組比較，rHuEPO處理各組腎組織MPO活性均明顯降低(P＜0.05,P＜0.01)。(3)腎臟組織學(xué)改變：模型組的腎組織損傷較假手術(shù)組明顯加重，而rHuEPO處理組的腎組織損傷較模型組明顯減輕。(4)腎組織P-選擇素和ICA