人胃癌組織中c-Met、osteopontin的表達(dá)及其與血管新生的關(guān)系.pdf

1、背景與目的：胃癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)，中國胃癌患者的死亡率占全部惡性腫瘤的首位。胃癌的浸潤和轉(zhuǎn)移是患者死亡的主要原因。如何提高患者的早期診斷率并對浸潤轉(zhuǎn)移機(jī)制進(jìn)行深入的研究是當(dāng)前國內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的焦點(diǎn)和熱點(diǎn)。胃癌的生長和轉(zhuǎn)移是一個復(fù)雜的多步驟過程，受諸多因素的影響，近年來腫瘤血管生成日益受到人們的關(guān)注，腫瘤的血管生成不僅為腫瘤組織的生長提供營養(yǎng)及氣體交換，同時也是腫瘤轉(zhuǎn)移的最直接門戶。 原癌基因c-met的蛋白產(chǎn)物

2、c-Met是肝細(xì)胞生長因子(HepatocyteGrowthFactor,HGF)的一個酪氨酸激酶受體，HGF/met信號系統(tǒng)在哺乳動物細(xì)胞中有多種功能，包括刺激或抑制細(xì)胞增殖，促使細(xì)胞運(yùn)動并侵襲到胞外基質(zhì),通過上皮細(xì)胞誘導(dǎo)腺/管的形態(tài)發(fā)育。c-Met的活化促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、分裂、侵襲、血管形成，c-Met的異常表達(dá)可能在腫瘤發(fā)生中起一定作用。 骨橋蛋白(Osteopontin)是一種分泌型、粘附性的糖基化磷蛋白，與其主要受體

3、整合素(intergrin)和CD44相互作用，參與多器官、多組織的生理病理過程，具有多種功能，如介導(dǎo)細(xì)胞移行、抑制鈣化、調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能、控制腫瘤細(xì)胞表型以及抑制凋亡等。近年來的研究揭示，骨橋蛋白在腫瘤細(xì)胞的粘附、移行、浸潤、血管新生以及腫瘤的微環(huán)境中起關(guān)鍵作用。 腫瘤內(nèi)微血管密度(MicrovesselDensity,MVD)是一個反映惡性腫瘤生物學(xué)行為的重要參數(shù)，與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，常用特異性高的CD34標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞。

4、目前國內(nèi)外關(guān)于聯(lián)合檢測c-Met、Osteopontin、MVD在腫瘤組織中的表達(dá)的研究相對較少。 本文通過蛋白水平檢測c-Met、Osteopontin在胃癌及正常胃黏膜組織中的表達(dá)情況并分析其與腫瘤間質(zhì)血管新生的關(guān)系，探討c-Met、Osteopontin在胃癌中的表達(dá)以及在胃癌的發(fā)生、浸潤和轉(zhuǎn)移中的作用，二者與腫瘤血管生成的關(guān)系及臨床病理學(xué)意義，為胃癌的發(fā)生、浸潤、轉(zhuǎn)移的預(yù)測、預(yù)后判斷提供參考依據(jù)。 材料與方法：(

5、1)組織標(biāo)本來源于鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科1999-2003年手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的胃癌標(biāo)本60例和正常胃黏膜20例。經(jīng)10％的福爾馬林固定后，常規(guī)脫水，石蠟包埋。 (2)應(yīng)用免疫組化SP(Streptavidinperoxidase)法檢測c-Met、Osteopotin及CD34在正常胃黏膜及胃癌組織中的表達(dá)情況。對CD34單克隆抗體標(biāo)記的血管計(jì)數(shù)微血管密度(MVD)以(-x)±s表示。 (3)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS

6、11.0版軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)和Fisher精確概率法檢驗(yàn)。c-Met和OPN的相關(guān)性采用spearman等級相關(guān)分析，以α=0.05作為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的判斷標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：(1)c-Met表達(dá)結(jié)果：c-Met的陽性表達(dá)以胞漿為主，亦可見胞膜表達(dá)。c-Met在正常胃黏膜組織中表達(dá)較弱，陽性表達(dá)率為15％(3/20)，在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為66.7％(40/6

7、0)，c-Met兩組中的表達(dá)差異具有顯著性(P＜0.01)。c-Met在浸潤達(dá)到或超過漿膜層組中的陽性表達(dá)率為83.3％，明顯高于浸潤未達(dá)到漿膜層組中的陽性表達(dá)率41.7％(P＜0.01)；c-Met在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率為78.0％，顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率42.1％(P＜0.01)；c-Met在有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率為79.5％，顯著高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率42.9％(P＜0.01)；c-Met與TNM分期密切

8、相關(guān)，Ⅲ+Ⅳ期c-Met的陽性表達(dá)率顯著高于Ⅰ+Ⅱ期(81.3％Vs50.0％，P＜0.01)。c-Met的表達(dá)與患者的年齡、性別及胃癌組織的分化程度無關(guān)。 (2)Osteopontin表達(dá)結(jié)果：Osteopontin的陽性表達(dá)以胞漿為主。在正常胃黏膜組織中未見到Osteopontin的陽性染色，在胃癌組織中陽性表達(dá)率為73.3％(44/60)，Osteopontin兩組中的表達(dá)差異具有顯著性(P＜0.01)。Osteopont

9、in在浸潤達(dá)到或超過漿膜層組中的陽性表達(dá)率為88.9％，顯著高于浸潤未達(dá)到漿膜層組中的陽性表達(dá)率50.0％(P＜0.01)；Osteopontin在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率為85.4％，顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率47.4％(P＜0.01)；Osteopontin在有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率為87.2％，顯著高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率47.6％(P＜0.01)；Osteopontin與TNM分期密切相關(guān)，Ⅲ+Ⅳ期Osteopon

10、tin的陽性表達(dá)率顯著高于Ⅰ+Ⅱ期(90.6％Vs53.5％，P＜0.01)。Osteopontin的表達(dá)與患者的年齡、性別及胃癌組織的分化程度無關(guān)。 (3)MVD檢測結(jié)果：CD34相關(guān)抗原陽性染色位于內(nèi)皮細(xì)胞胞膜。MVD在胃癌組織及正常胃黏膜組織中分別為28.06±7.98、14.83±7.46，MVD在胃癌組織中明顯高于正常黏膜(P＜0.01)。浸潤達(dá)到或超過漿膜層組中的MVD為32.12±6.11，明顯高于浸潤未達(dá)漿膜層組

11、中的21.96±6.47(P＜0.01)；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組MVD為30.91±6.47，則顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的21.89±7.54(P＜0.01)；在有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組MVD為31.72±6.43，則顯著高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組中的21.52±6.30(P＜0.01)；TNM分期中，Ⅲ+Ⅳ期中MVD為32.58±5.76，亦顯著高于Ⅰ+Ⅱ期中的22.85±7.01(P＜0.01)。MVD與患者的年齡、性別及胃癌組織的分化程度無關(guān)。 (4

12、)胃癌組織中c-Met的表達(dá)與MVD的關(guān)系：c-Met陽性表達(dá)組的MVD為29.90±7.43，顯著高于c-Met陰性表達(dá)組的24.47±8.05(P＜0.05)。 (5)胃癌組織中Osteopontin的表達(dá)與MVD的關(guān)系：Osteopontin陽性表達(dá)組的MVD為30.20±7.46，顯著高于Osteopontin陰性表達(dá)組22.06±6.31(P＜0.01)。 (6)胃癌組織中c-Met、Osteopontin均為

13、陽性時MVD值為(32.97±5.52)，單一c-Met陽性時的MVD值為(20.09±5.32)、單一Osteopontin陽性時的MVD值為(22.00±5.38)，均為陰性時MVD值最小，為(20.00±4.35)。 (7)C-Met和骨橋蛋白在胃癌組織中表達(dá)的相關(guān)性：60例胃癌組織中，c-Met和Osteopontin蛋白共陽性表達(dá)者占36例，共陰性表達(dá)者12例，二者表達(dá)呈正相關(guān)，經(jīng)Spearman相關(guān)分析顯示rs=0.

14、533(P＜0.05)，C-Met和Osteopontin的表達(dá)存在一定的正相關(guān)性。 結(jié)論：(1)c-Met在胃癌組織中的陽性表達(dá)率顯著高于在正常胃黏膜組織中的表達(dá)，c-Met的高表達(dá)與臨床分期、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。c-Met的高表達(dá)可能參與了胃癌的發(fā)展。 (2)Osteopontin的高表達(dá)與胃癌臨床分期、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。提示Osteopontin的高表達(dá)可能參與了胃癌的發(fā)展并增強(qiáng)了胃癌的侵襲性

15、。 (3)血管生成在胃癌進(jìn)展中具有重要的作用。 (4)胃癌組織中c-Met和Osteopontin的陽性表達(dá)密切相關(guān)，c-Met、Osteopontin是胃癌組織中血管生成過程中重要的調(diào)節(jié)因子，在腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)機(jī)制中可能存在著協(xié)同關(guān)系，二者共同參與了胃癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程。 (5)c-Met和Osteopontin的表達(dá)之間有顯著相關(guān)性，且與胃癌的發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示c-Met和Osteopontin