鈣視網(wǎng)膜蛋白在先天性巨結(jié)腸癥腸壁的表達(dá)及意義.pdf

1、本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法，觀察對(duì)照組腸壁、先天性巨結(jié)腸癥(Hirschsprung's disease，HD)患者有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段和無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段腸壁神經(jīng)組織中鈣視網(wǎng)膜蛋白(Calretinin，CR)的表達(dá)結(jié)果，并同時(shí)對(duì)比觀察神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neurone specific enolase，NSE)、S-100蛋白(S-100 protein，S-100)、組織蛋白酶D(cathpsin D，CAD)的三種腸道神經(jīng)標(biāo)志物在對(duì)

2、照組及巨結(jié)腸腸壁表達(dá)情況，目的在于了解HD的病理生理改變以及尋找診斷先天性巨結(jié)腸的簡(jiǎn)便有效的方法。 方法： 1、收集蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院小兒外科2005-2008年手術(shù)切除HD標(biāo)本54例，包括HD擴(kuò)張段與痙攣段。以15例年齡與之相符的無(wú)HD患兒的手術(shù)切除結(jié)腸標(biāo)本作為對(duì)照組。 2、分別對(duì)HD痙攣段、擴(kuò)張段、對(duì)照組腸壁組織切片進(jìn)行CR、NSE、S-100、CAD的免疫組織化學(xué)染色和HE染色，計(jì)算機(jī)成像系統(tǒng)照相存盤，用

3、圖像分析軟件(Image-Pro-Plus)分別判定各指標(biāo)在HD擴(kuò)張段與痙攣段神經(jīng)叢中陽(yáng)性染色面積百分比。所得數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理分析。 結(jié)果： 1、無(wú)論是HE或免疫組化染色HD的擴(kuò)張段神經(jīng)節(jié)細(xì)胞皆存在，肌層神經(jīng)纖維有不同程度的排列改變，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞大小不等；痙攣段均未見(jiàn)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。 2、在正常結(jié)腸及HD擴(kuò)張段腸壁免疫組化染色可見(jiàn)鈣視網(wǎng)膜蛋白在肌間及黏膜下神經(jīng)叢中對(duì)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，神經(jīng)纖

4、維也呈陽(yáng)性反應(yīng)；而HD痙攣段腸壁的免疫組化染色則可見(jiàn)鈣視網(wǎng)膜蛋白在肌間神經(jīng)叢及黏膜下神經(jīng)叢大多表達(dá)陰性(90.7％)，僅少量呈弱陽(yáng)性表達(dá)(9.3％)。NSE在正常腸壁及HD擴(kuò)張段腸壁肌間、粘膜下神經(jīng)叢中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及神經(jīng)纖維中均有表達(dá)；在HD痙攣段腸壁可見(jiàn)NSE陽(yáng)性表達(dá)的神經(jīng)纖維；S-100不表達(dá)于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，組織蛋白酶D表達(dá)于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。 3、定量分析：CR、NSE、S-100、CAD分別在HD痙攣段之間神經(jīng)叢中陽(yáng)性染色面積百分

5、率與其在HD擴(kuò)張段神經(jīng)叢中陽(yáng)性染色面積百分率存在差異，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論： 1、鈣視網(wǎng)膜蛋白免疫組化染色可很好的顯示正常結(jié)腸及HD擴(kuò)張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及神經(jīng)纖維，而在HD痙攣段該指標(biāo)免疫組化染色結(jié)果呈陰性或弱陽(yáng)性表達(dá)?？勺鳛樵\斷HD很好的神經(jīng)標(biāo)志物。 2、鈣視網(wǎng)膜蛋白在HD的痙攣段腸管內(nèi)的肌間神經(jīng)叢及黏膜下神經(jīng)叢大多表達(dá)陰性，僅少量呈弱陽(yáng)性。對(duì)小塊組織或直腸黏膜活檢診斷HD有幫助，可作為診