FTY720在同種肝細(xì)胞移植大鼠中的免疫抑制作用.pdf

1、目的：掌握大鼠急性藥物性肝功能衰竭模型的建立；掌握應(yīng)用膠原酶溶液作肝臟原位循環(huán)、分離、純化肝細(xì)胞的技術(shù)；研究免疫抑制劑FTY720對同種肝細(xì)胞移植大鼠外周血T細(xì)胞數(shù)量及亞群以及對外周血T淋巴細(xì)胞IL一2Rα(CD25+)的影響；探討FTY720在肝細(xì)胞移植中免疫抑制作用的可能機(jī)制。 方法：10％D-氨基半乳糖(D-gal)溶液按1.0g/kg一次性腹腔注射建立大鼠急性藥物性肝衰竭模型。采用肝細(xì)胞原位灌注法分離和純化肝細(xì)胞，制備成

2、肝細(xì)胞懸液，肝細(xì)胞濃度為4×107個/ml，于2小時內(nèi)經(jīng)脾臟移植。動物分組：經(jīng)脾臟肝細(xì)胞移植后的大鼠隨機(jī)分為二組。Ⅰ組為對照組，不予以處理；Ⅱ組為實(shí)驗組組，口服FTY720，用量5mg/kg.day。觀測術(shù)后鼠的肝臟功能、脾臟病理組織變化，流式細(xì)胞法測大鼠的外周血T細(xì)胞亞群，包括CD4+、CD8+，以及IL-2受體CD25+。 結(jié)果：24小時后制成肝衰竭模型；模型組丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、血清總膽紅素(TBil)高于正常組，差異

3、有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01；肝細(xì)胞移植后第3天、5天測實(shí)驗組丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、血清總膽紅素(TBil)低于對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05；實(shí)驗組外周血淋巴細(xì)胞計數(shù)，實(shí)驗組明顯低于對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05；實(shí)驗組外周血CD4+、CD4+/CD8+低于對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01；實(shí)驗組外周血CD8+高于對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01；實(shí)驗組外周血IL-2Rα(CD25+)低于對照組，差別有統(tǒng)計