FTY720治療大鼠急性脊髓損傷對(duì)淋巴細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:本研究從免疫炎性反應(yīng)的角度探討急性脊髓損傷(AcuteSpinalCordInjury，ASCI)的治療。通過觀察新型免疫抑制劑FTY720治療大鼠急性脊髓損傷對(duì)外周血及局部損傷組織淋巴細(xì)胞的影響，以及對(duì)大鼠急性脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能恢復(fù)的影響，揭示FTY720的神經(jīng)保護(hù)作用，探討其治療急性脊髓損傷的作用機(jī)制。
　　 方法:采用Allen's打擊法建立T10大鼠急性脊髓損傷模型，將大鼠隨機(jī)分為5組:A組，正常對(duì)照組，6只，

2、不做任何處理直接取材;B組，假手術(shù)組，27只，僅行椎板切除，不損傷脊髓，不給藥;C組，脊髓損傷組，27只，造模成功后不給藥;D組:脊髓損傷+FTY720全身用藥組，27只，造模成功后以3mg/kg的FTY720腹腔注射;E組:脊髓損傷+FTY720局部用藥組，27只，造模成功后以3mg/kg的FTY720蛛網(wǎng)膜下腔注射。A組老鼠行BBB評(píng)分后直接取材。B、C、D、E組行淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、HE染色、免疫組化染色的老鼠于術(shù)后12h、48h、72

3、h、1w取材，BBB評(píng)分在術(shù)后1d、3d、7d、14d、21d、28d進(jìn)行。采用流式細(xì)胞儀觀察各組大鼠術(shù)后外周血和局部損傷組織淋巴細(xì)胞的變化，采用BBB評(píng)分法觀察急性脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)情況，采用HE染色方法觀察脊髓組織病理變化，采用免疫組織化學(xué)染色方法觀察膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)強(qiáng)度的變化。所得結(jié)果采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件及Image-proplus6.0醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 結(jié)果:BBB評(píng)分

4、、HE染色病理學(xué)觀察、GFAP染色結(jié)果均提示應(yīng)用FTY720治療大鼠急性脊髓損傷對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能的恢復(fù)具有保護(hù)作用，且E組對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能的保護(hù)作用優(yōu)于D組。外周血中，C組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)的CD3、CD4、CD4/CD8比值均低于B組，D組應(yīng)用FTY720后，CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值均較C組有明顯下降，E組各指標(biāo)的變化介于C組與D組之間。局部損傷組織中，C組CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值均高于B組，E組應(yīng)用FTY7