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1、 本文采用了經(jīng)典的分子生物學(xué)研究路線,即從基因表達蛋白,再制備抗體,從而獲得抗S100P的高純度和高特異性多克隆抗體,為臨床胃癌檢測提供重要依據(jù)和奠定基礎(chǔ)。首先通過RT-PCR方法擴增S100P基因全長CDs序列,并將目的基因克隆至原核表達載體pET-22b(+);并隨后將陽性克隆導(dǎo)入大腸桿菌BL21(DE3)PlysS中進行誘導(dǎo)表達;利用pET-22b(+)載體在其多克隆位點末端含有多聚組氨酸的特點,通過Ni2+純化柱進行親和層析純化
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