宮內(nèi)發(fā)育遲緩大鼠出生不同階段胰島功能及胰島素敏感性的研究.pdf

1、目的： 研究宮內(nèi)發(fā)育遲緩(intrauterine growth retardation，IUGR)大鼠出生后不同階段胰島功能以及胰島素敏感性的變化特點(diǎn)，探討IUGR與2型糖尿病之間的內(nèi)在聯(lián)系。 方法： 1、采用營(yíng)養(yǎng)不良法(妊娠11天起予正常50％飼料)建立IUGR大鼠模型，以出生后不同階段(1天、3周、7周、10周、15周及36周)雄性大鼠為研究對(duì)象，通過稱量體重、胰重，并計(jì)算胰重/體重比值等手段，觀察其生長(zhǎng)發(fā)

2、育狀況。 2、運(yùn)用抗胰島素抗體免疫組化染色法，對(duì)IUGR大鼠出生不同階段胰腺組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)及量化分析，了解不同階段胰島形態(tài)和胰島素表達(dá)的變化。 3、采用腹腔糖耐量試驗(yàn)(intraperitoneal glucose tolerance test，IPGTT)及胰島素釋放試驗(yàn)(insulin releasing test，IRT)，測(cè)定糖負(fù)荷后不同時(shí)點(diǎn)血糖和胰島素的水平，檢測(cè)IUGR大鼠出生不同階段糖耐量及胰島素釋放的變化

3、。 4、以胰島分離純化技術(shù)獲得IUGR大鼠出生不同階段的胰島，進(jìn)行胰島體外葡萄糖刺激下胰島素釋放(glucose-stimulated insulinsecretion，GSIS)試驗(yàn)，采用放射免疫法(Radioimmunoassay，RIA)檢測(cè)上清中胰島素濃度，以評(píng)價(jià)胰島體外分泌功能。 5、運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerasechain reaction，RT-P

4、CR.)對(duì)第36周IUGR大鼠胰腺組織胰島素合成相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè)，以進(jìn)一步探討胰島細(xì)胞功能異常的機(jī)制。 6、采用腹腔胰島素耐量試驗(yàn)(insulin tolerance test，ITT)，測(cè)定胰島素負(fù)荷后不同時(shí)點(diǎn)的血糖值，以了解IUGR大鼠出生不同階段胰島素敏感性的變化。 結(jié)果： 1、IUGR組大鼠出生時(shí)體重、胰重和胰重/體重比值均顯著低于正常組(P<0.001)；出生后體重逐漸追趕，但胰重及胰重/體重比值始終低

5、于正常組(P<0.05)。 2、IUGR組新生鼠胰腺組織中胰島素陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞面積及胰島素染色陽(yáng)性率均明顯小于正常組(P<0.01)；胰島素陽(yáng)性染色面積隨年齡逐漸增大，至36周時(shí)IUGR組大鼠胰島素陽(yáng)性面積與正常組已無明顯差異，但胰島平均染色光密度顯著降低(P<0.05)。 3、IUGR組新生鼠空腹血糖及胰島素水平均低于正常新生鼠，但糖負(fù)荷后120min和180min血糖值明顯高于正常組(P<0.05)。隨年齡增長(zhǎng)，IUG

6、R組大鼠逐漸出現(xiàn)糖耐量減退，表現(xiàn)為糖負(fù)荷后血糖下降減慢，胰島素早期出現(xiàn)代償分泌增多，以15周為著(P<0.05)，后期(36周)則分泌減少。 4、胰島體外GSIS功能檢測(cè)結(jié)果提示，15周起IUGR組大鼠胰島體外胰島素刺激指數(shù)明顯低于正常組(P<0.01)。 5、對(duì)胰島素合成相關(guān)基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，第36周IUGR組大鼠胰腺組織胰島素基因1(Insulinl)表達(dá)明顯減少(P<0.05)，但其他基因【胰島素基因2(Insulin

7、2)、胰一十二指腸同源盒基因-1(pancreaticduodenal homeobox-1，PDX-1)】表達(dá)無明顯差異。 6、IUGR組大鼠第10周起即出現(xiàn)給予胰島素負(fù)荷后血糖值下降遲滯于正常組(P<0.05)，且隨年齡增長(zhǎng)逐漸明顯。 結(jié)論： 1、IUGR大鼠胰腺發(fā)育受損，胰島β細(xì)胞功能減退，隨年齡增長(zhǎng)逐漸出現(xiàn)糖耐量減低及胰島素敏感性下降。 2、IUGR大鼠后期胰島素分泌減少可能與胰腺組織Insuli