長期酒精攝入對大鼠胰島素敏感性及肝臟胰島素信號傳導(dǎo)分子mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、糖尿病已成為嚴(yán)重危害人類健康的三大疾病之一，據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)計(jì)，到2025年全球糖尿病患者將達(dá)3億左右，我國也將有4000～6000萬糖尿病患者，糖尿病已成為我國的主要公共衛(wèi)生問題之一。近年來，越來越多的流行病學(xué)研究結(jié)果提示長期不同劑量飲酒對胰島素敏感性有著不同的影響：適量飲酒與胰島素敏感性增強(qiáng)及2型糖尿病發(fā)病危險(xiǎn)降低有關(guān)，而長期過量飲酒與胰島素抵抗及2型糖尿病發(fā)病危險(xiǎn)增加有關(guān)。實(shí)驗(yàn)研究方面，也有類似的研究報(bào)道，適量飲酒可增強(qiáng)胰島素的敏

2、感性，過量飲酒降低胰島素敏感性，但至今仍缺乏系統(tǒng)的研究，其機(jī)理更不清楚。我國是酒的生產(chǎn)、消費(fèi)大國，常年飲酒者酒精攝入量占總能量攝入的10％，從實(shí)驗(yàn)角度研究酒精與胰島素敏感性的關(guān)系、探討其機(jī)理并為糖尿病預(yù)防提供參考成為刻不容緩的醫(yī)療課題。 胰島素抵抗是2型糖尿病發(fā)病機(jī)制的重要環(huán)節(jié)并且是啟動因素，貫穿于2型糖尿病的整個(gè)發(fā)生和發(fā)展過程中。胰島素抵抗的機(jī)理已成為研究的熱點(diǎn)，胰島素信號傳導(dǎo)分子、脂代謝、脂肪細(xì)胞分泌因子、炎性細(xì)胞因子等都被

3、認(rèn)為與此有關(guān)，但是其中的詳細(xì)機(jī)理目前還不清楚。胰島素與靶細(xì)胞膜表面受體結(jié)合后發(fā)生一系列級聯(lián)反應(yīng)，產(chǎn)生生物效應(yīng)，這一過程中胰島素信號的有效傳導(dǎo)是先決條件，因此胰島素信號傳導(dǎo)途徑中關(guān)鍵分子的數(shù)量、功能異常已經(jīng)成為研究的重點(diǎn)。 糖尿病是多因素引起的以慢性高血糖為特征的代謝綜合癥，在體內(nèi)糖代謝中，肝臟是一個(gè)重要的器官，它是攝取葡萄糖并合成、儲存糖原的主要器官，每Kg肝臟可儲存65g糖原，同時(shí)肝糖原是機(jī)體空腹?fàn)顟B(tài)下血糖的重要來源，更是饑餓

4、狀態(tài)下糖異生的主要器官，在穩(wěn)定機(jī)體血糖中起著重要作用。肝臟是胰島素的三大靶器官之一，其對胰島素的敏感性降低是胰島素抵抗的重要因素之一；同時(shí)肝臟也是酒精代謝的主要器官，在研究酒精對胰島素敏感性影響機(jī)理的研究中有著重要作用。目前關(guān)于不同劑量酒精對肝臟中胰島素信號傳導(dǎo)分子的表達(dá)或功能影響的研究未見報(bào)道。 目的：本實(shí)驗(yàn)將借鑒2型糖尿病病因?qū)W的研究進(jìn)展，通過整體動物實(shí)驗(yàn)研究不同劑量酒精攝入對雌、雄大鼠胰島素敏感性及肝臟組織胰島素受體及受體

5、后各信號傳導(dǎo)分子的影響，系統(tǒng)地研究酒精劑量對胰島素敏感性的影響，并在分子生物學(xué)水平揭示酒精攝入影響胰島素敏感性的分子機(jī)制，為有效預(yù)防2型糖尿病提供科學(xué)依據(jù)。 研究方法：本實(shí)驗(yàn)以清潔級Wistar大鼠為研究對象，以灌胃方式給予不同劑量酒精建立飲酒模型，設(shè)立對照組及低、中、高劑量酒精組，每組雌雄各10只，攝入酒精劑量分別為0、1.0、2.0和3.3ml·(kg·bw)-1·day-1，每日經(jīng)灌胃一次給予。給予酒精18周后，進(jìn)行口服葡

6、萄糖耐量試驗(yàn)(oralglucosetolerancetest，OGTT)，第19周末，斷頭取血分離血清，測定空腹血糖(FPG)、空腹血胰島素(FIN)，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HomeostasisModelAssessment，HOMA-IR=[FPG(mmol/L)×FIN(mIU/L)]/22.5)、HOMA-β功能指數(shù)(HOMAβ-cellindex，HBCI=20×FINS/(FPG-3.5))作為反映胰島素敏感性、胰島β細(xì)胞功

7、能的指標(biāo)。取肝組織經(jīng)HE染色后觀察普通病理學(xué)改變。分離大鼠肝組織，提取組織總RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測定肝臟IR、IRS-1、IRS-2、PI3-K、GLUT-2mRNA的表達(dá)水平。通過觀察酒精對大鼠胰島素敏感性的影響以及酒精劑量與肝臟胰島素信號傳導(dǎo)分子mRNA表達(dá)水平及HOMA-IR之間的關(guān)系，探討酒精是否影響肝臟胰島素信號傳導(dǎo)分子mRNA表達(dá)水平以及這一變化與酒精引起的胰島素敏感性改變的關(guān)系。 研究結(jié)

8、果：整體動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，長期過量酒精攝入可使大鼠血糖升高、糖耐量受損、胰島素敏感性降低，表現(xiàn)為Ln(HOMA-IR)升高；同時(shí)可改變肝臟的病理結(jié)構(gòu)，損傷胰島β細(xì)胞分泌功能，這與多數(shù)現(xiàn)有研究結(jié)果一致。另外，長期過量酒精攝入可以降低肝臟胰島素信號傳導(dǎo)分子mRNA表達(dá)水平，這種改變可能參與了過量酒精攝入導(dǎo)致的胰島素抵抗，提示酒精對肝臟胰島素信號傳導(dǎo)分子表達(dá)的影響可能是酒精影響胰島素敏感性的分子機(jī)理之一。酒精對胰島素敏感性的影響存在著性別差異