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1、目的:探討EGb對(duì)癲癇點(diǎn)燃模型幼鼠學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能的影響及可能機(jī)制,為臨床應(yīng)用EGb治療癲癇兒童認(rèn)知功能障礙提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:選擇生后21日齡SD大鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NS組)、模型對(duì)照組(PT27d組、PT214d組)以及銀杏葉提取物治療組(EGb7d組、EGb14d組),應(yīng)用戊四氮(pentetrazole,PTZ)制作慢性點(diǎn)燃癲癇模型;使用Y-型迷宮測(cè)試模型建立前后及EGb治療前后大鼠行為學(xué)變化;通過免疫組
2、化法觀察大鼠點(diǎn)燃成功后EGb7d或EGb14d治療對(duì)海馬區(qū)細(xì)胞增殖情況的影響;同時(shí)通過標(biāo)記5-溴脫氧尿核苷(BrdU)、NeuN、GFAP觀察神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)分化情況。
結(jié)果:
1、慢性點(diǎn)燃模型的建立及癲癇行為學(xué)觀察:NS組無癲癇發(fā)作,其余4組大鼠在點(diǎn)燃后均達(dá)到連續(xù)5次Ⅱ級(jí)以上發(fā)作。
2、Y-型電迷宮測(cè)試結(jié)果:EGb治療前,PTZ各點(diǎn)燃大鼠與NS組相比,達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)所需的電擊次數(shù)明顯增多(
3、P<0.01);EGb(300mg/kg.d)治療7d和14d后的兩組大鼠達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)的電擊次數(shù)均明顯少于相應(yīng)的PTZ點(diǎn)燃對(duì)照組(P<0.01),而EGb7d和EGb14d治療組,達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)所需的電擊次數(shù)未見明顯差異(P>0.05)。
3、NSCs增殖情況:選擇Nestin陽性細(xì)胞表達(dá)作為判斷NSCs增殖的指標(biāo),結(jié)果我們發(fā)現(xiàn)PTZ點(diǎn)燃組Nestin陽性細(xì)胞表達(dá)量較NS組明顯增多(P<0.01);EGb7d組和EGb14d
4、組Nestin陽性細(xì)胞表達(dá)量較相對(duì)應(yīng)PTZ點(diǎn)燃對(duì)照組的表達(dá)又進(jìn)一步有所增多(P<0.05),但是隨著7d至14dEGb療程的增加,EGb14d組Nestin陽性細(xì)胞數(shù)量要低于EGb7d組(P<0.05),所有增殖的Nestin陽性細(xì)胞均主要分布于海馬CA1、CA3區(qū)顆粒細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞下層。
4、NSCs分化情況:EGb治療后BrdU/NeuN細(xì)胞數(shù)明顯多于EGb治療前(E7和E14組),而且EGb14d組的BrdU/Ne
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