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1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文Wnt/β--catenin通路在結(jié)腸癌血管生成擬態(tài)形成中的作用姓名:齊麗莎申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):臨床醫(yī)學(xué);腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:孫保存2012-05天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文6 ) 體外三維培養(yǎng)( t h r e e d i m e n s i o n a lc u l t u r e ,3 D ) 觀察D k k l 對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞管狀結(jié)構(gòu)形成能力的影響。7 ) 檢測(cè)D k k l 過表達(dá)后E M T 相關(guān)蛋白、V
2、M 形成相關(guān)蛋白及結(jié)腸癌干樣細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)情況,探討w 州1 3 .c a t e m n 信號(hào)通路調(diào)控結(jié)腸癌細(xì)胞V M 形成的分子機(jī)制。8 ) 將穩(wěn)定過表達(dá)D k k l 的H C T l l 6 細(xì)胞接種到裸鼠體內(nèi),觀察D k k l 在體內(nèi)對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖、侵襲能力的影響,免疫組化檢測(cè)腫瘤組織內(nèi)E M T 相關(guān)蛋白的表達(dá)和V M 形成情況,進(jìn)一步明確在結(jié)腸癌中抑制W n t /B .c a t e m n 信號(hào)通路對(duì)V M 形成
3、的影響。結(jié)果:1 ) 人結(jié)腸癌組織中存在V M ,且存在V M 的腫瘤組織分化較差、臨床分期高并易發(fā)生轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)( P < O .0 5 ) ;2 ) 存在V M 的結(jié)腸癌組織中腫瘤細(xì)胞高表達(dá)V i m e n t i n ,低表達(dá)E .c a d h e r i n ( P < 0 .0 5 ) ,提示存在V M 的結(jié)腸癌組織中腫瘤細(xì)胞多發(fā)生E M T ;W n t /1 3 。c a t e n i n 信號(hào)通路活化的腫
4、瘤細(xì)胞更易發(fā)生E M T ;存在V M 的結(jié)腸癌組織中0 .c a t e n i n 核表達(dá)較高,而D k k l 表達(dá)相對(duì)較低( 尸< O .0 5 ) ,提示W(wǎng) n t /D .c a t e m n 信號(hào)通路活化的結(jié)腸癌組織更易發(fā)生V M 。3 ) 轉(zhuǎn)染D k k l 的H C T l l 6 細(xì)胞D l d < l 表達(dá)增加,c .m y c 和c y c l i n D l 表達(dá)降低。4 ) D k k l 過表
5、達(dá)抑制H C T l l 6 細(xì)胞的增殖( P < O .0 5 ) 。5 ) D k k l 過表達(dá)的H C T l l 6 細(xì)胞修復(fù)劃痕能力明顯減弱( P < o .0 5 ) ,粘附能力明顯增加儼< 0 .0 5 ) ,侵襲能力明顯減弱妒< O .0 5 ) 。6 ) D k k l 過表達(dá)的H C T l l 6 細(xì)胞形成管狀結(jié)構(gòu)能力比對(duì)照組細(xì)胞明顯減弱。7 ) D k k l 過表達(dá)的H C T l 1
6、6 細(xì)胞與對(duì)照組細(xì)胞相比E .c a d h e r i n 、K e r a t i n l 8 表達(dá)升高,V i m e n t i n ,F(xiàn) i b r o n e c t i n ,1 3 .c a t e m n ,S n a i l ,T w i s t ,V E —c a d h e r i n ,L g r 5 ,C D l 3 3 表達(dá)降低。8 ) 接種了D k k l 過表達(dá)H C T l l 6 細(xì)胞的小鼠與對(duì)照組
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