伽瑪?shù)吨委煷笫箫D葉癲癇對(duì)認(rèn)知功能及海馬Toll-like受體4表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)氯化鋰-匹羅卡品顳葉癲癇大鼠的伽瑪?shù)墩丈洌接戀が數(shù)犊拱B效果及對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，以及伽瑪?shù)墩丈浜箫D葉癲癇大鼠海馬中TLR4蛋白的表達(dá)變化，以探討在其癲癇發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：根據(jù)動(dòng)物是否致癇及接受伽瑪?shù)墩丈?，隨機(jī)將健康成年SD雄性大鼠70只分為3組，①A組：(正常對(duì)照組)鹽水注射組，10只；②B組：(癲癇對(duì)照組)單純氯化鋰--匹羅卡品致癇大鼠，10只；③C組：30GY和50GY伽瑪?shù)墩丈渎然?匹羅卡品

2、致癇大鼠，40只。顳葉癲癇大鼠經(jīng)腹腔注射氯化鋰及匹羅卡品制備，以雙側(cè)海馬為照射靶區(qū)對(duì)大鼠進(jìn)行伽瑪?shù)墩丈?，照射邊緣劑量分別為30GY和50GY，觀察并記錄各組大鼠伽瑪?shù)吨委熐?、后癲癇發(fā)作情況。于伽瑪?shù)墩丈浜?天和30天，應(yīng)用Morris水迷宮對(duì)各組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力進(jìn)行評(píng)測(cè)。后留取腦組織，分別利用免疫組化及免疫蛋白印跡法對(duì)TLR4在大鼠海馬組織中表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　1、伽瑪?shù)墩丈渎然?匹羅卡品癲癇大鼠雙側(cè)海馬后觀

3、察發(fā)現(xiàn)，隨觀察期的延長(zhǎng)，兩個(gè)劑量組均可明顯減輕大鼠的癲癇發(fā)作的程度，發(fā)作次數(shù)亦不同程度的減少。其中50Gy照射后3周出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的發(fā)作減少(P<0.05)，而30Gy照射后4周發(fā)作減少才出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異(P<0.05)。
　　2、水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組比較，癲癇對(duì)照組大鼠水迷宮尋找平臺(tái)逃避潛伏期時(shí)間顯著延長(zhǎng)，游泳距離增加，穿越平臺(tái)的次數(shù)及在原平臺(tái)象限的游泳距離百分率減少(P<0.05)，提示癲癇組大鼠學(xué)習(xí)記憶能

4、力明顯下降；而與癲癇組相比，伽瑪?shù)吨委熃M(30Gy、50Gy)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　3、利用免疫組織化學(xué)技術(shù)分別對(duì)各組大鼠海馬區(qū)TLR4蛋白表達(dá)進(jìn)行研究顯示：TLR4蛋白主要表達(dá)在海馬CA3區(qū)錐體細(xì)胞胞漿內(nèi)，呈現(xiàn)棕黃色顆粒。與正常對(duì)組相比，癲癇對(duì)照組大鼠海馬TLR4蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與癲癇對(duì)照組相比，伽瑪?shù)吨委熃M(30Gy、50Gy)TLR4蛋白表達(dá)逐漸減少，具有時(shí)間劑量依賴性，差異

5、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　利用免疫印跡實(shí)驗(yàn)分別對(duì)各組大鼠海馬區(qū)TLR4蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示：癲癇對(duì)照組與正常對(duì)照組TLR4蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。伽瑪?shù)吨委熃M(30Gy、50Gy)與癲癇對(duì)照組TLR4蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具有時(shí)間劑量依賴性(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、小劑量多次注射匹羅卡品制備顳葉癲癇大鼠成功率高，是研究顳葉癲

6、癇的理想模型。
　　2、在氯化鋰-匹羅卡品顳葉癲癇大鼠模型中，邊緣劑量30GY和50GY伽瑪?shù)墩丈渚梢钥刂瓢d癇發(fā)作，其療效具有一定的時(shí)間劑量依賴性。癲癇大鼠在水迷宮中記憶能力明顯下降，伽瑪?shù)墩丈浜蟠笫笳J(rèn)知能力無(wú)明顯下降。
　　3、大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后，TLR4蛋白在癲癇組海馬CA3區(qū)細(xì)胞中表達(dá)較正常對(duì)照組大鼠明顯增加，伽瑪?shù)吨委熀蟀d癇組大鼠海馬CA3區(qū)細(xì)胞中表達(dá)逐漸減少，存在時(shí)間劑量依賴性，提示TLR4蛋白在癲癇的發(fā)病和抗癲