IL-27、IL-17及IL-10在EAN中的表達及IL-27干預(yù)對其表達的影響.pdf

1、目的:吉蘭，巴雷綜合征是一種常見的累及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的自身免疫性疾病，其主要病理特征為周圍神經(jīng)的髓鞘脫失和炎性細胞浸潤，其病因和發(fā)病機制尚不十分清楚。實驗性自身免疫性神經(jīng)炎（EAN）是研究GBS的理想模型。研究發(fā)現(xiàn)促炎性細胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在自身免疫性疾病的發(fā)病過程中起了很重要的作用。IL-27是2002年新發(fā)現(xiàn)的一種細胞因子，研究發(fā)現(xiàn)IL-27對致病性Th1、Th17細胞均具有廣泛的免疫抑制作用，可抑制其產(chǎn)生促炎性細胞因子，此外，IL

2、-27還可以促進抗炎性細胞因子IL-10的產(chǎn)生，可以緩解許多實驗性自身免疫性疾病的癥狀。本實驗運用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶連反應(yīng)（RT-PCR）觀察IL-27P28、IL-27EBI3、IL-17、IL-10mRNA在實驗性自身免疫性神經(jīng)炎（EAN）模型組及IL-27干預(yù)組Lewis大鼠外周血、脾臟、淋巴結(jié)、坐骨神經(jīng)中的動態(tài)表達變化，初步探討IL-27對EAN的干預(yù)效果及IL-27、IL-17、IL-10在EAN發(fā)病機制中可能起到的作用，為臨床尋找

3、新的治療吉蘭-巴雷綜合癥及其他自身免疫性疾病的策略奠定理論基礎(chǔ)。 方法:104只Lewis大鼠，清潔級，雄性，6-8周，體重160-180克，隨機分為模型組EAN組（n=6，6，6，6）；完全弗氏佐劑對照組CFA組（n=6，6，6，6）； IL-27干預(yù)組EAN+IL-27組（n=6，6，6，6）；生理鹽水干預(yù)對照組EAN+NS組（n=4，4，4，4）；生理鹽水對照組NS組（n=4，4，4，4）。EAN組、EAN+IL-27組、

4、EAN+NS組大鼠用周圍神經(jīng)髓鞘蛋白P258-73aa和完全弗氏佐劑免疫，CFA組只注射完全弗氏佐劑作為致病組的對照。IL-27干預(yù)組在免疫接種后第5于雙腋下及雙腹股溝處皮下注射IL-27，生理鹽水干預(yù)對照組在免疫接種后第5于雙腋下及雙腹股溝處皮下注射生理鹽水。觀察實驗動物的發(fā)病情況并按評分標準做EAN嚴重性的臨床評估并觀察IL-27對EAN病程的影響。分別在第7天，第16天，第24天，第33天處死動物，取大鼠的坐骨神經(jīng)根制作病理切片，

5、行HE染色和Weil氏髓鞘染色觀察其病理改變。斷頸處死后取得的外周血、脾、淋巴結(jié)、坐骨神經(jīng)經(jīng)相關(guān)處理后凍存，用RT-PCR技術(shù)檢測各組大鼠體內(nèi)IL-27P28、IL-27EBI3、IL-17、IL-10 mRNA的動態(tài)表達。 結(jié)果: EAN大鼠在免疫后6-8天發(fā)病，16-18天時癥狀達高峰，24-33天好轉(zhuǎn)，EAN及生理鹽水干預(yù)對照組大鼠體重明顯減輕或不增；IL-27干預(yù)組大鼠體重先下降或不增后呈緩慢增長；生理鹽水對照組和佐劑對

6、照組大鼠體重呈增長趨勢。IL-27P28mRNA的表達表現(xiàn)為持續(xù)增高，在發(fā)病的恢復(fù)早期達到最高（與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01）。EBI3、IL-17 mRNA的表達有著相似的動態(tài)變化，在發(fā)病初即可見表達升高（與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01）；發(fā)病高峰時表達達高峰，（與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01）。IL-10 mRNA在發(fā)病初及發(fā)病高峰期始終表達較低，在恢復(fù)早期達高峰（與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.

7、01）。EAN+IL-27組大鼠癥狀較EAN組及EAN+NS對照組大鼠輕，其坐骨神經(jīng)中炎性細胞浸潤也較EAN+NS組減少，脫髓鞘程度較輕。EAN+IL-27組IL-17在發(fā)病各期均低于EAN組及EAN+NS組，有顯著性差異（P<0.01），IL-27P28、IL-27EBI3及IL-10在發(fā)病各期均高于EAN組及EAN+NS組（P<0.01）。 結(jié)論:①IL-27能夠有效抑制Lewis大鼠EAN病情的進展②IL-17的分泌可能與