ADMA與冠心病的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景:
　　 非對(duì)稱性二甲基精氨酸(ADMA)是內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)的內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,它可使內(nèi)皮NO合成減少,造成內(nèi)皮功能紊亂。內(nèi)皮功能紊亂先于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生,并在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生和進(jìn)展中起著重要的作用。ADMA還可以使體內(nèi)過(guò)氧化物(ROS)、組織因子(TF)等物質(zhì)生成增多,導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定性,促使ACS的發(fā)生。這些都表明ADMA在冠心病發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程中起著重要的作用。我們實(shí)驗(yàn)室前期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明,

2、ACS患者其體內(nèi)ADMA水平明顯升高。另外,炎癥在不穩(wěn)定斑塊發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用,伴隨炎癥過(guò)程所產(chǎn)生的多種基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)可以通過(guò)各種酶學(xué)效應(yīng)降解斑塊的纖維帽,使粥樣斑塊變得纖薄易損。
　　 研究目的:
　　 在本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)ACS患者體內(nèi)ADMA水平研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討ADMA對(duì)單核細(xì)胞ROS、EMMPRIN(CD147)及MMP-9的影響,進(jìn)而探討ADMA在ACS中所起的作用。
　　 研究方法

3、:
　　 1.實(shí)驗(yàn)選用THP-1單核細(xì)胞系。
　　 2.分別用不同濃度ADMA刺激THP-1細(xì)胞,利用熒光探針DCFH-DA(2',7'-二氫二氯熒光黃雙乙酸鈉)進(jìn)行ROS的檢測(cè)。
　　 3.分別用ADMA不同濃度和不同時(shí)間對(duì)THP-1細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),半定量PCR和Western Blot檢測(cè)EMMPRIN和MMP-9的mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　 4.在ADMA干預(yù)的基礎(chǔ)上,用NF-κB阻斷劑TPCK預(yù)處

4、理THP-1細(xì)胞,半定量PCR和Western Blot檢測(cè)EMMPRIN和MMP-9的mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.ADMA2μM、5μM、10μM均能明顯促進(jìn)THP-1細(xì)胞ROS分泌增多。
　　 2.ADMA2μM、5μM、10μM均能使THP—1細(xì)胞EMMPRIN及MMP-9分泌增多,且這種作用可被TPCK所拮抗。
　　 結(jié)論:
　　 1.ADMA可增加THP-1細(xì)胞ROS