游離脂肪酸對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞促增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡的作用.pdf

1、目的:本研究通過細(xì)胞培養(yǎng)的方法,了解不同濃度,不同碳鏈長度和不同飽和度的脂肪酸對(duì)培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及生長周期的直接影響.方法:按內(nèi)皮細(xì)胞的常規(guī)培養(yǎng)方法,將內(nèi)皮細(xì)胞分裝于100ml細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,每瓶加入培養(yǎng)基5ml,置于5％CO2,37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育,將培養(yǎng)的生長正常的ECV-304細(xì)胞用0.25％胰蛋白酶-0.02％EDTA消化液消化細(xì)胞,按5X105ce11分別接種于100ml的培養(yǎng)瓶,及96孔板,分為C16:0、C18:0、

2、C24:0、C18:1、C18:2及對(duì)照6組,每種脂肪酸選用4個(gè)濃度,每個(gè)濃度重復(fù)4孔,分別加入各濃度的條件培養(yǎng)液培養(yǎng)48小時(shí),然后用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞凋亡及周期進(jìn)行檢測(cè)及活細(xì)胞染色,96孔板用于MTT實(shí)驗(yàn),用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行培養(yǎng)液上清LDH測(cè)定.結(jié)論:1游離脂肪酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有生長抑制及促凋亡的作用.2飽和脂肪酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響較大,且呈濃度依賴性.糖尿病及有胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)的患者血管病變比普通人群升高,其血漿中飽和脂肪酸升高是內(nèi)皮