大鼠前庭毛細胞神經(jīng)遞質(zhì)受體分布及功能.pdf

1、第一部分 單細胞RT-PCR方法的建立及煙堿型乙酰膽堿受體α9亞基在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中的表達 目的：乙酰膽堿(Ach)是脊椎動物外周前庭系統(tǒng)最主要的傳出神經(jīng)遞質(zhì)，并且煙堿型乙酰膽堿受體α9亞基(nAChR)被認為是介導(dǎo)外周前庭系統(tǒng)中膽堿能傳出信號的主要受體之一。研究表明人類與其他哺乳類動物(包括大鼠)的乙酰膽堿能傳出神經(jīng)纖維支配模式相近，而人類與鳥類之間乙酰膽堿能傳出神經(jīng)纖維支配模式間有許多差別。因此以大鼠為研究對

2、象可以幫助了解人類單個前庭毛細胞的神經(jīng)纖維支配模式及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方式，進而為前庭疾病的病理機制闡明及前庭疾病的治療提供理論基礎(chǔ)。本研究目的為建立單細胞RT-PCR方法及檢測α9nAChR在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中的表達。 方法：用RT-PCR方法檢測α9nAChR在大鼠前庭終器中的表達；建立單細胞RT-PCR方法并用單細胞RT-PCR方法檢測α9nAChR在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中的表達。 結(jié)論：此研究成功地建立了單細胞RT

3、-PCR方法，其可以有效地檢測在單個前庭毛細胞中某種mRNA特異性的表達。研究結(jié)果證實α9nAChR在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中有表達，并進一步表明α9nAChR是介導(dǎo)外周前庭系統(tǒng)中膽堿能傳出信號的主要受體之一。 第二部分 γ-氨基丁酸B型受體GB1亞基在大鼠前庭終器的表達 目的：檢測大鼠前庭終器中γ-氨基丁酸B型受體(GABAB受體)GB1亞基的表達，探討GABAB受體在大鼠前庭終器的分布。 方法：根據(jù)G

4、eneBank公布的大鼠GABAB受體GB1亞基的mRNA序列設(shè)計跨內(nèi)含子的特異性引物，運用RT-PCR方法檢測大鼠前庭終器中編碼GABAB受體GB1亞基的mRNA的表達，對PCR產(chǎn)物測序確認。 結(jié)論：在大鼠前庭終器組織中有GABAB受體GB1亞基的表達。提示GABAB受體可能介導(dǎo)前庭外周系統(tǒng)GABA能信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)。 第三部分 GABAB受體在大鼠單個Ⅰ型前庭毛細胞中的表達及功能 目的：GABA是大鼠外周前

5、庭系統(tǒng)的傳出神經(jīng)遞質(zhì)之一。通常認為哺乳類動物Ⅰ型前庭毛細胞(VHCsⅠ)為傳入神經(jīng)盞完全包裹而沒有傳出神經(jīng)末梢直接支配。但1991年Wackymetal.報道CGRP免疫陽性傳出神經(jīng)末稍偶爾會穿過包繞大鼠VHCsⅠ的傳入神經(jīng)盞與某些大鼠VHCsⅠ直接接觸。目前尚無關(guān)于GABA能傳出神經(jīng)末稍是否直接支配大鼠VHCsⅠ的研究。本研究目的為探討GABAB受體在大鼠VHCsI中表達及其電生理特性，提出并證明GABA能傳出神經(jīng)末稍可能直接支配某些