糖尿病大鼠免疫系統(tǒng)的動態(tài)變化和環(huán)孢菌素A的干預(yù)作用.pdf

1、目的：糖尿病(diabetesmellitus，DM)是胰島素(insulin，INS)絕對或相對不足引起的以高血糖為特征的一組綜合征，其發(fā)病率逐年上升。DM慢性并發(fā)癥可累及全身組織器官，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。近年來，研究發(fā)現(xiàn)免疫因素在DM及其并發(fā)癥發(fā)病過程中起到了重要的作用。我們先前的系列研究發(fā)現(xiàn)鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的DM大鼠的胰腺、腎臟、視網(wǎng)膜、垂體、主動脈、坐骨神經(jīng)和腦等多器官有大量的免疫復(fù)合物沉積，在應(yīng)用環(huán)孢菌素A(CsA

2、)干預(yù)后明顯減少。本實驗擬研究STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠免疫器官、免疫細(xì)胞的變化以及環(huán)孢菌素A對免疫系統(tǒng)的干預(yù)效果，進一步研究DM及其并發(fā)癥發(fā)生的免疫學(xué)機制，為DM的免疫治療提供理論依據(jù)。 方法：108只雄性SD大鼠，隨機分為正常對照組(CON)、單純DM組(DM)、胰島素治療組(INS)、低劑量CsA干預(yù)組(CSL)、中劑量CsA干預(yù)組(CSM)和高劑量CsA干預(yù)組(CSH)。采用尾靜脈注射STZ(50mg/kg)方法制造DM大鼠

3、模型，造模后72小時和1周時取測定大鼠尾尖血隨機血糖，兩次血糖均大于16.0mmol/L為造模成功。造模成功后，CON組和DM組給予生理鹽水0.1ml/d皮下注射，INS組按每只給予中效胰島素(劑量4U/d～6U/d)皮下注射，CSL組、CSM組和CSH組均給予CsA皮下注射，劑量依次為0.5mg/kg.d、1mg/kg.d和2mg/kg.d。于造模后2、4、8周時分批處死各組大鼠并留取標(biāo)本。監(jiān)測各組大鼠的血糖、體重、血清總蛋白(TP)

4、、血清白蛋白(ALB)和尿微量白蛋白(UMA)等指標(biāo)的變化；測定造模后2、4、8周時各組大鼠脾臟重量和胸腺重量；通過免疫組化和免疫熒光法檢測脾臟和小腸粘膜中的CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞以及IgG、IgA和IgM陽性細(xì)胞的變化。 結(jié)果：除CON組外，其余各組大鼠造模后72小時和1周時尾尖隨機血糖均大于16.0mmol/L。造模后2、4、8周時，與CON組相比較，各實驗組大鼠的總體變化趨勢為：血糖明顯增高，體重明顯降低，

5、尿微量白蛋白增高；脾臟重量降低，IgA、IgG陽性細(xì)胞增多，脾臟CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞增多，CD4+/CD8+比值降低；小腸粘膜中CD4+T淋巴細(xì)胞增多，而CD8+T淋巴細(xì)胞減少，CD4+/CD8+比值升高；胸腺重量明顯降低。與DM組比較，各CsA干預(yù)組大鼠的總體變化趨勢為：血清總蛋白和白蛋白升高；脾臟重量、胸腺重量略高，脾臟CD8+T淋巴細(xì)胞減少，CD4+/CD8+比值升高，IgA、IgG陽性細(xì)胞減少；小腸粘膜中CD8

6、+T淋巴細(xì)胞增多，CD4+/CD8+比值降低。 結(jié)論：采用STZ(50mg/kg)尾靜脈注射能夠成功建立糖尿病大鼠模型。STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠免疫系統(tǒng)出現(xiàn)脾臟萎縮、胸腺退化和淋巴細(xì)胞數(shù)目、比例的異常變化，不同組織中T淋巴細(xì)胞亞群的變化是不一致的。CsA對于STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的肝臟功能具有一定的保護作用。CsA能夠減緩STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的脾臟萎縮和胸腺退化。CsA能夠改善STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠脾臟、小腸粘膜中T淋巴細(xì)胞亞群