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1、目的:(1)體外擴(kuò)增人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子165基因全長(zhǎng)序列并構(gòu)建真核質(zhì)粒表達(dá)載體;(2)用重組載體轉(zhuǎn)染原代培養(yǎng)的人胎兒成纖維細(xì)胞,得到轉(zhuǎn)基因細(xì)胞株;(3)對(duì)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進(jìn)行初步研究,探討其直接應(yīng)用于創(chuàng)面移植及用于復(fù)合人工皮的構(gòu)建的可行性并為其提供原料.結(jié)論:利用分子生物學(xué)方法,成功構(gòu)建了人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子165直核表達(dá)載體pcDNA3-hVEGF<,165>;該載體轉(zhuǎn)染原代培養(yǎng)的人胎兒成纖維細(xì)胞,獲得的轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞能夠表達(dá)、分泌
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