堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞游離鎂離子濃度的研究.pdf

1、目的：堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)對(duì)人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(humanumbilicalvein endothelial cells，HUVECs)內(nèi)游離鎂離子濃度([Mg2+]i)的調(diào)節(jié)機(jī)制研究。
　　 方法：將新鮮臍帶內(nèi)灌注膠原酶消化，沖洗，離心，獲得內(nèi)皮細(xì)胞，向血管內(nèi)皮細(xì)胞中加入帶有胎牛血清的M199細(xì)胞液制成細(xì)胞懸液，放入每孔內(nèi)放置載玻片的24孔培養(yǎng)板中，置

2、于37℃，5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)傳代培養(yǎng)至2～4代，運(yùn)用膜片鉗全細(xì)胞技術(shù)破膜給藥，采用熒光指示劑mag-fura-2-AM，運(yùn)用PTi陽(yáng)離子測(cè)定系統(tǒng)動(dòng)態(tài)測(cè)HUVECs的[Mg2+]i。
　　 結(jié)果：在靜息狀態(tài)下HUVECs的[Mg2+]i為(0.52±0.02)mmol·L-1。細(xì)胞外Mg2+濃度分別為0 mmol·L-1、1 mmol·L-1和2 mmol·L-1時(shí)，給予bFGF(10μg·L-1)處理后，HUVEC

3、s的[Mg2+]i增加量分別為(0.78±0.13)mmol.L-1(0.76±0.11)mmol·L-1和(0.74±0.14)mmol·L-1。細(xì)胞外Mg2+濃度為0 mmol·L-1時(shí)，bFGF劑量的增加與其促進(jìn)[Mg2+]i增加量有明顯的劑量依賴性關(guān)系，且bFGF半數(shù)有效劑量是(12.03±1.08)μg·L-1。細(xì)胞外液中BAPTA-AM分別為100 mmol·L-1和0μmol·L-1時(shí)，bFGF(10μg·L-1)促使HU

4、VECs的[Mg2+]i增加量分別為(0.78±0.14)mmol·L-1和(0.76±0.11)mmol·L-1。細(xì)胞外液中Na+為145 mmol·L-1和0μmol·L-1時(shí)，bFGF(10μg·L-1)促使HUVECs的[Mg2+]i增加量分別為(0.76±0.12)mmol·L-1和(0.75±0.12)mmol·L-1。用10μmol·L-1山羊免疫球蛋白(goat IgG)和10μmol·L-1三磷酸肌醇激抗體(IPK3B