miR-146a通過靶基因IRAK1對IL-17的調(diào)控在銀屑病中的研究.pdf

1、第一部分:斑塊狀銀屑病皮損中miR-146a與IL-17的表達及其相關性
　　目的:了解斑塊狀銀屑病患者皮損及非皮損區(qū)miR-146a與IL-17 mRNA、TNF-αmRNA、IFN-γ mRNA的表達情況及其相關性。
　　方法:通過qRT-PCR檢測19例斑塊狀銀屑病患者皮損區(qū)與非皮損區(qū)miR-146a與IL-17mRNA、TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA表達。采用PSI評分對活檢部位皮損的嚴重程度進行評估。<

2、br>　　結果:斑塊狀銀屑病皮損中miR-146a表達水平（2.31±0.43）高于非皮損區(qū)(1.17±0.24)，差異有統(tǒng)計學意義(n=19 P＜0.01)，活動期(n=12)與靜止期(n=7)表達比較無明顯差異(P＞0.05)，皮損中miR-146a表達與PSI評分成正相關(n=19 r=0.53 P＜0.05)。斑塊狀銀屑病皮損中IL-17 mRNA表達(3.54±0.83)高于非皮損區(qū)（1.02±0.44），差異具有統(tǒng)計學意義(

3、n=19 P＜0.01)，且活動期表達（n=124.78±1.09）高于靜止期（n=71.43±0.84），差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA在皮損區(qū)與非皮損區(qū)表達無明顯差異(P＞0.05)，靜止期與活動期表達比較無明顯差異(P＞0.05)。皮損中miR-146a表達與皮損中IL-17 mRNA表達成正相關(n=19 r=0.0.68 P＜0.01)，與TNF-αmRNA、IFN-γ mRNA

4、表達無明顯相關(P＞0.05)。
　　結論:miR-146a在斑塊狀銀屑病皮損中升高表達可反映皮損嚴重程度，與IL-17 mRNA表達具有相似性，可能參與了IL-17的調(diào)節(jié)通路。
　　第二部分:斑塊狀銀屑病外周血miR-146a與IL-17的表達及其相關性
　　目的:了解斑塊狀銀屑病外周血中miR-146a與IL-17、TNF-α、IFN-γ的表達情況及其相關性。
　　方法:收集20例斑塊狀銀屑病患者（12例來源

5、于切皮患者）和10例正常對照外周血，通過ELISA對血漿中IL-17、TNF-α、IFN-γ的表達進行檢測。通過qRT-PCR檢測外周血PBMC中miR-146a與IL-17 mRNA、TNF-α mRNA、 IFN-γ mRNA的表達水平。采用PASI評分對疾病的嚴重程度進行評估。
　　結果:銀屑病患者PBMC中miR-146a表達（n=202.60±1.02）高于正常對照(n=100.42±0.07)，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜

6、0.05)，但活動期(n=10)與靜止期(n=10)比較無明顯差異(P＞0.05)，活動期患者miR-146a表達與此次病程正相關(n=10r=0.74 P＜0.05)，PBMC中miR-146a表達與PASI評分正相關(n=20 r=0.67P＜0.01)。銀屑病血漿中IL-17的水平（n=204.41±0.62pg/ml）高于正常對照（n=102.49±0.18pg/ml），差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且活動期(n=105.

7、67±1.09 pg/ml)高于靜止期（n=103.14±0.32pg/ml），差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，活動期PBMC中IL-17 mRNA表達水平(n=101.42±0.31)高于靜止期（n=100.34±0.19），差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。銀屑病血漿中TNF-α、IFN-γ表達與正常人比較無明顯差異(P＞0.05)，靜止期患者血漿TNF-α表達水平（n=101.31±0.38pg/ml）高于活動期（n=100.

8、23±0.12pg/ml），差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但TNF-α mRNA水平、IFN-γ、IFN-γ mRNA靜止期與活動期比較無明顯差異(P＞0.05)。PBMC中miR-146a表達與IL-17蛋白水平正相關(n=20r=0.78 P＜0.001)，與IL-17 mRNA水平正相關(n=20 r=0.59 P＜0.01)。外周血PBMC中miR-146a表達水平（n=452.48±24.15）高于皮損（n=41.89±

9、0.99），差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但二者無相關性(P＞0.05)。
　　結論:銀屑病患者外周血PBMC中的miR-146a高表達，可反映皮損嚴重程度，在活動期可反映疾病的活動度，可作為反映疾病嚴重度及活動度的潛在臨床指標。miR-146a與IL-17表達相關性提示miR-146a可能參與了IL-17的表達調(diào)控。
　　第三部分:miR-146a靶基因IRAK1在銀屑病皮損與外周血的表達
　　目的:了解斑塊狀

10、銀屑病皮損及外周血PBMC中miR-146a靶基因IRAK1的表達特點。
　　方法:qRT-PCR比較6例斑塊狀銀屑病皮損與非皮損區(qū)IRAK1 mRNA表達，10例正常對照與12例斑塊狀銀屑病外周血PBMC中IRAK1 mRNA表達。Western blot比較1對皮損與非皮損區(qū)IRAK1蛋白水平的表達，1例正常對照與4例斑塊狀銀屑病外周血PBMC中IRAK1蛋白水平的表達。
　　結果:銀屑病皮損中IRAK1 mRNA表達（

11、2.18±0.50）高于非皮損區(qū)（0.28±0.2），差異具有統(tǒng)計學意義(n=6 P＜0.01)，IRAK1蛋白水平在皮損中表達高于非皮損區(qū)。銀屑病外周血PBMC中IRAK1 mRNA表達(n=120.36±0.07)低于正常對照(n=101.90±0.59)，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，IRAK1蛋白水平在銀屑病患者PBMC中較正常人表達明顯降低。銀屑病皮損及外周血PBMC中IRAK1 mRNA的表達在靜止期與活動期之間無明顯