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1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文腎細(xì)胞癌中Survivin基因的實(shí)驗(yàn)研究姓名:彭健申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):泌尿外科指導(dǎo)教師:葉章群20040501華中月斗扶大學(xué)周濟(jì)醫(yī)拳R犯2004月體t學(xué)位it文第一部分SUrviviln基因在腎癌中的表達(dá)及意義目的:探討Survivin基因在腎細(xì)飽癌中的表達(dá)及其生物學(xué)意義。方法:人腎細(xì)胞癌株ACHN和769P常規(guī)條件下培養(yǎng)收集和保存70例經(jīng)手術(shù)及病理證實(shí)的腎癌組織和相應(yīng)癌旁組織標(biāo)本。SABC免疫組織化學(xué)方法和
2、westemblot法用以檢測(cè)surnvm蛋白的表達(dá)suvivinmRNA水平的表達(dá)采用半定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)?ATPCR)方法檢測(cè)腎癌組織凋亡指數(shù)采用原位:末端標(biāo)記法(TUNEL)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:免疫組化染色顯示56170(80%)例腎癌組織有survivin蛋白的陽(yáng)性表達(dá),survivin陽(yáng)性表達(dá)顆粒主要位于胞漿,而相應(yīng)癌旁組織未見有survivin陽(yáng)性表達(dá)。Wes宜emblot顯示2株腎癌細(xì)胞株和63170(90%)例腎癌組織不
3、同程度地表達(dá)survivin蛋白,而相應(yīng)癌旁組織中無(wú)一例檢測(cè)到survivin的陽(yáng)J性表達(dá)Survivin的剎古與患者的年齡、性別、腫瘤大小、偶發(fā)腎癌等無(wú)明顯關(guān)系(P均0.05)oRTPCR結(jié)果顯示2析腎癌細(xì)胞權(quán)拜n63170(90%)的腎癌組織表達(dá)survivinmRNA,與westemblot所松im0的蛋白水平的表達(dá)一致。所有腎癌組織中均可檢A」到調(diào)亡細(xì)胞,但survivin表達(dá)陽(yáng)性組凋亡指數(shù)為1.032%10.301%,顯著低于
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