慢性溫和應(yīng)激及高溫因素對大鼠血管內(nèi)皮功能的影響.pdf

1、目的：
　　許多研究表明，慢性應(yīng)激是引發(fā)人類心血管系統(tǒng)疾病的重要因素。本研究采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激的方法，建立慢性應(yīng)激大鼠模型和高溫應(yīng)激模型，通過對血清指標(biāo)的測定、血管內(nèi)皮中相關(guān)基因的表達(dá)，以及電鏡觀察血管內(nèi)皮形態(tài)學(xué)的改變，來探討慢性應(yīng)激及高溫因素下，引起血管內(nèi)皮損傷的機(jī)制問題。
　　方法：
　　選取2-3月齡的清潔級雄性SD大鼠40只，將大鼠隨即分為3組：對照組(n=10)；慢性溫和應(yīng)激模型組(n=15)；高溫+

2、慢性溫和應(yīng)激組模型組(n=15)。模型組均采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激刺激，獨(dú)籠飼養(yǎng)。高溫+應(yīng)激組除接受慢性應(yīng)激外，還需接受42℃高溫應(yīng)激2小時(shí)，連續(xù)進(jìn)行21天。實(shí)驗(yàn)中，每7天對大鼠進(jìn)行稱重、記錄，并于眼眥靜脈取血，離心后-80℃凍存。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測量3次血清皮質(zhì)醇濃度，以確認(rèn)造模成功。造模成功后，于大鼠腹主動(dòng)脈取血、離心，用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血槳ET-1，血清IL-6、ICAM-1、KLK1的濃度；取大鼠主動(dòng)脈組織，運(yùn)用RT

3、-PRC方法測定血管內(nèi)皮NOS3、ICAM-1及KLK1基因的表達(dá)量；取部分主動(dòng)脈組織，樹脂包埋，超薄切片后，透射電子顯微鏡下觀察對照組與應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組間血管內(nèi)皮形態(tài)學(xué)的改變。
　　結(jié)果：
　?。?）慢性應(yīng)激對情緒狀態(tài)的影響：應(yīng)激第一周，高溫+應(yīng)激組體重低于其它兩組（p＜0.05）；從第二周起應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組體重顯著少于對照組（p＜0.05），且高溫+應(yīng)激組體重要明顯低于應(yīng)激組（p＜0.001）；從應(yīng)激第一周起，應(yīng)

4、激組和高溫+應(yīng)激組血清皮質(zhì)醇濃度均高于對照組（p＜0.05）；第一周、第三周應(yīng)激組血清皮質(zhì)醇的濃度要高于高溫+應(yīng)激組（p＜0.05）。
　?。?）慢性應(yīng)激及高溫因素對血槳 ET-1，血清IL-6、ICAM-1、KLK1的影響：應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組的ICAM-1、IL-6和ET-1的濃度均高于對照組（p＜0.05）；高溫+應(yīng)激組的ICAM-1、IL-6和ET-1的濃度要高于應(yīng)激組（p＜0.05）；應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組的KLK-1的濃

5、度要低于對照組（p＜0.05）。
　?。?）慢性應(yīng)激及高溫因素對血管內(nèi)皮NOS3、ICAM-1、KLK1基因的影響：應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組主動(dòng)脈血管內(nèi)皮中ICAM-1基因的表達(dá)量要高于對照組（p＜0.05）。高溫+應(yīng)激組血管內(nèi)皮ICAM-1基因的表達(dá)量要明顯高于應(yīng)激組（p＜0.05）；應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組NOS3基因表達(dá)量要低于對照組（p＜0.05）。高溫+應(yīng)激組NOS3基因表達(dá)量低于應(yīng)激組（p＜0.05）；對照組血管內(nèi)皮KLK1基

6、因表達(dá)量要顯著高于應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組（p＜0.05）。
　?。?）慢性應(yīng)激及高溫因素對血管內(nèi)皮電鏡檢測結(jié)果：與對照組相比，應(yīng)激組內(nèi)皮細(xì)胞外部凸體不規(guī)范，核形態(tài)不規(guī)則，內(nèi)皮與基膜連接不緊密，空泡明顯。胞內(nèi)異染色質(zhì)含量多，常染色質(zhì)含量下降；高溫+應(yīng)激組內(nèi)皮細(xì)胞不連續(xù)，部分區(qū)域內(nèi)皮細(xì)胞脫落，腫脹。內(nèi)皮與基膜連接不緊密，空泡明顯，胞內(nèi)異染色質(zhì)含量明顯增多。
　　結(jié)論：
　　慢性溫和應(yīng)激可導(dǎo)致雄性大鼠血管內(nèi)皮功能損傷。高溫環(huán)境