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文檔簡介
1、目的:
許多研究表明,慢性應(yīng)激是引發(fā)人類心血管系統(tǒng)疾病的重要因素。本研究采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激的方法,建立慢性應(yīng)激大鼠模型和高溫應(yīng)激模型,通過對血清指標(biāo)的測定、血管內(nèi)皮中相關(guān)基因的表達(dá),以及電鏡觀察血管內(nèi)皮形態(tài)學(xué)的改變,來探討慢性應(yīng)激及高溫因素下,引起血管內(nèi)皮損傷的機(jī)制問題。
方法:
選取2-3月齡的清潔級雄性SD大鼠40只,將大鼠隨即分為3組:對照組(n=10);慢性溫和應(yīng)激模型組(n=15);高溫+
2、慢性溫和應(yīng)激組模型組(n=15)。模型組均采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激刺激,獨(dú)籠飼養(yǎng)。高溫+應(yīng)激組除接受慢性應(yīng)激外,還需接受42℃高溫應(yīng)激2小時(shí),連續(xù)進(jìn)行21天。實(shí)驗(yàn)中,每7天對大鼠進(jìn)行稱重、記錄,并于眼眥靜脈取血,離心后-80℃凍存。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測量3次血清皮質(zhì)醇濃度,以確認(rèn)造模成功。造模成功后,于大鼠腹主動(dòng)脈取血、離心,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血槳ET-1,血清IL-6、ICAM-1、KLK1的濃度;取大鼠主動(dòng)脈組織,運(yùn)用RT
3、-PRC方法測定血管內(nèi)皮NOS3、ICAM-1及KLK1基因的表達(dá)量;取部分主動(dòng)脈組織,樹脂包埋,超薄切片后,透射電子顯微鏡下觀察對照組與應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組間血管內(nèi)皮形態(tài)學(xué)的改變。
結(jié)果:
?。?)慢性應(yīng)激對情緒狀態(tài)的影響:應(yīng)激第一周,高溫+應(yīng)激組體重低于其它兩組(p<0.05);從第二周起應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組體重顯著少于對照組(p<0.05),且高溫+應(yīng)激組體重要明顯低于應(yīng)激組(p<0.001);從應(yīng)激第一周起,應(yīng)
4、激組和高溫+應(yīng)激組血清皮質(zhì)醇濃度均高于對照組(p<0.05);第一周、第三周應(yīng)激組血清皮質(zhì)醇的濃度要高于高溫+應(yīng)激組(p<0.05)。
?。?)慢性應(yīng)激及高溫因素對血槳 ET-1,血清IL-6、ICAM-1、KLK1的影響:應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組的ICAM-1、IL-6和ET-1的濃度均高于對照組(p<0.05);高溫+應(yīng)激組的ICAM-1、IL-6和ET-1的濃度要高于應(yīng)激組(p<0.05);應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組的KLK-1的濃
5、度要低于對照組(p<0.05)。
?。?)慢性應(yīng)激及高溫因素對血管內(nèi)皮NOS3、ICAM-1、KLK1基因的影響:應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組主動(dòng)脈血管內(nèi)皮中ICAM-1基因的表達(dá)量要高于對照組(p<0.05)。高溫+應(yīng)激組血管內(nèi)皮ICAM-1基因的表達(dá)量要明顯高于應(yīng)激組(p<0.05);應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組NOS3基因表達(dá)量要低于對照組(p<0.05)。高溫+應(yīng)激組NOS3基因表達(dá)量低于應(yīng)激組(p<0.05);對照組血管內(nèi)皮KLK1基
6、因表達(dá)量要顯著高于應(yīng)激組和高溫+應(yīng)激組(p<0.05)。
?。?)慢性應(yīng)激及高溫因素對血管內(nèi)皮電鏡檢測結(jié)果:與對照組相比,應(yīng)激組內(nèi)皮細(xì)胞外部凸體不規(guī)范,核形態(tài)不規(guī)則,內(nèi)皮與基膜連接不緊密,空泡明顯。胞內(nèi)異染色質(zhì)含量多,常染色質(zhì)含量下降;高溫+應(yīng)激組內(nèi)皮細(xì)胞不連續(xù),部分區(qū)域內(nèi)皮細(xì)胞脫落,腫脹。內(nèi)皮與基膜連接不緊密,空泡明顯,胞內(nèi)異染色質(zhì)含量明顯增多。
結(jié)論:
慢性溫和應(yīng)激可導(dǎo)致雄性大鼠血管內(nèi)皮功能損傷。高溫環(huán)境
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