miR-208b和miR-499在巴馬香豬骨骼肌肌纖維類型轉(zhuǎn)化中的作用研究.pdf

1、MicroRNAs是一類進(jìn)化上非常保守的小的非編碼RNA，在骨骼肌發(fā)育中起到了至關(guān)重要的調(diào)控作用。本實(shí)驗(yàn)以巴馬香豬為對(duì)象，探究miR-208b和miR-499在骨骼肌肌纖維類型轉(zhuǎn)化中的作用，為揭示巴馬香豬優(yōu)良肉質(zhì)形成機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。獲得的主要研究結(jié)果如下:
　　1.miR-208b和miR-499在巴馬香豬背最長(zhǎng)肌、股二頭肌、心臟中均有高豐度表達(dá)，在其他組織中的表達(dá)豐度較低。對(duì)巴馬香豬不同發(fā)育時(shí)期的背最長(zhǎng)肌進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)miR

2、-208b和miR-499的表達(dá)量在胚胎期持續(xù)升高，出生后表達(dá)量下降。
　　2.巴馬香豬背最長(zhǎng)肌發(fā)育過程中，MyHCⅠ的表達(dá)量顯著性逐漸降低(P＜0.05），ⅡA的表達(dá)量變化不大（P＜0.05），ⅡⅩ的表達(dá)量顯著性逐漸升高(P＜0.05），ⅡB的表達(dá)量在E90開始升高。胚胎期氧化型肌纖維標(biāo)志基因的mRNA所占的比例高于酵解型，表達(dá)比例在E40最高，隨后下降;成年時(shí)期氧化型肌纖維標(biāo)志基因的mRNA所占的比例低于酵解型。
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3、.巴馬香豬胚胎期，AMPK的表達(dá)與MyHCⅠ的表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.9561，P＜0.05)，PGC-1α的表達(dá)與MyHCⅡB的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.9410，P＜0.05)。
　　4.miR-208b和miR-499的表達(dá)量均隨著C2C12和小鼠肌肉衛(wèi)星細(xì)胞的分化顯著上升(P＜0.05）。
　　5.C2C12和小鼠肌肉衛(wèi)星細(xì)胞過表達(dá)miR-208b后，肌纖維形態(tài)更細(xì)長(zhǎng);在分化中后期顯著上調(diào)MyHCⅠ的表達(dá)量（P＜

4、0.05），顯著下調(diào)MyHCⅡB的表達(dá)量（P＜0.05）;分化早中期標(biāo)志基因MyoG在C2C12及肌肉衛(wèi)星細(xì)胞分化過程中的表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組無差異(P＞0.05);C2C12及肌肉衛(wèi)星細(xì)胞分化過程中，AMPK的表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均無顯著差異（P＞0.05）;肌肉衛(wèi)星細(xì)胞中PGC-1α的表達(dá)水平顯著上調(diào)(P＜0.05）。
　　6.C2C12和小鼠肌肉衛(wèi)星細(xì)胞過表達(dá)miR-499后，肌纖維形態(tài)更細(xì)長(zhǎng);在分化中后期顯著上調(diào)MyHCⅠ