柄海鞘（Styela clava）天然產(chǎn)物的提取、結(jié)構(gòu)鑒定及生理活性研究.pdf

1、　　本文從以下幾個(gè)方面對(duì)柄海鞘生理活性物質(zhì)進(jìn)行了初步的研究?！　∈紫?，將柄海鞘的鞘體和鞘囊進(jìn)行精細(xì)剝離，避免了物質(zhì)的相互干擾，更好的進(jìn)行物質(zhì)的定位。對(duì)柄海鞘鞘體，按照目前比較常用的天然產(chǎn)物提取分離方法，將樣品冷凍干燥后，用甲醇：甲苯(3：1)浸泡，收集濾液，減壓蒸餾得到的濃縮液用1MNaNO3水溶液萃取，收集水相，減壓濃縮至NaNO3晶體析出。用氯仿反復(fù)浸泡NaNO3晶體，收集氯仿浸提液，減壓濃縮，得紅棕色浸膏狀鞘體粗提物。粗提物依次

2、用5％NaHCO3、Na2CO3、NaOH進(jìn)行分級(jí)萃取，并對(duì)3種萃取液分別進(jìn)行濃縮，冷凍干燥后，記為PⅠ、PⅡ、PⅢ。其中，PⅠ、PⅡ經(jīng)聚酰胺柱層析，用H2O、10％CH3CH2OH、50％CH3CH2OH、100％CH3CH2OH4個(gè)梯度依次洗脫；4個(gè)梯度的濃縮液再經(jīng)SephadexLH-20凝膠層析，高效液相色譜分析及半制備，最終獲得6種組分：FⅠA、FⅠB、FⅢA、FⅢB、Fw和FIV。　　其次，利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對(duì)FⅠA、FⅢA

3、、Fw和FIV進(jìn)行抗腫瘤活性篩選。結(jié)果表明，F(xiàn)w對(duì)B37乳腺癌和BEL-7402肝癌均沒有抑制作用；FⅠA、FⅢA對(duì)B37乳腺癌基本沒有作用；FIV對(duì)B37乳腺癌細(xì)胞的生長，在不同作用時(shí)間和不同濃度均有不同程度的抑制作用，而以60μg/ml濃度時(shí)作用最為顯著，24h、48h、72h3個(gè)時(shí)間段均表現(xiàn)出極顯著的抑制作用。　　最后，采用質(zhì)譜技術(shù)，對(duì)Fw進(jìn)行成分分析和結(jié)構(gòu)解析，結(jié)果表明Fw為1.2-雙(5-甲基-2-苯并噁唑)-乙烯?！　∠?/p>