黃花蒿除草活性物質(zhì)的提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、黃花蒿(Artemisia annua Linn.)俗名草蒿、臭蒿等，是菊科艾屬類一年生草本植物。黃花蒿為短日照植物，抗瘠、抗?jié)?、抗旱及抗病能力較強(qiáng)，黃花蒿分布全國(guó)各地，棲息地適應(yīng)性強(qiáng)。黃花蒿在生長(zhǎng)過(guò)程中不斷釋放除草活性物質(zhì)抑制其它植物或雜草的萌發(fā)和生長(zhǎng)，因而在它們所形成的群落中，很少有其它植物或雜草生長(zhǎng)。黃花蒿釋放的化學(xué)物質(zhì)在環(huán)境中易降解，對(duì)人、畜毒性低，將為開(kāi)發(fā)新型天然源生物除草劑提供科學(xué)依據(jù)，解決化學(xué)除草劑對(duì)環(huán)境的造成污染問(wèn)題，為

2、綠色食品生產(chǎn)提供保障。
　　為了明確黃花蒿在雜草防除中的作用，本文對(duì)黃花蒿進(jìn)行了提取，對(duì)提取物進(jìn)行了除草活性和除草機(jī)制測(cè)定，并對(duì)提取物進(jìn)行了分離和結(jié)構(gòu)鑒定。采用單因素試驗(yàn)明確了黃花蒿除草活性物質(zhì)的最佳提取工藝。系統(tǒng)研究了黃花蒿葉部乙醇提取物對(duì)不同雜草的活性。從黃花蒿葉部乙醇提取物對(duì)蘿卜萌發(fā)生理的影響方面，探討了黃花蒿葉部乙醇提取物的除草機(jī)制。以蘿卜種子作為指示受體，采用系統(tǒng)溶劑分離法和柱層析法對(duì)黃花蒿葉部乙醇提取物進(jìn)行了分離、純化

3、，并對(duì)除草活性高的流分進(jìn)行了GC-MS檢測(cè)，初步確定了黃花蒿除草活性物質(zhì)的主要成分。以下為本研究主要結(jié)果:
　　1.采用單因素試驗(yàn)明確了提取方法、采集部位及采集時(shí)間對(duì)黃花蒿提取物除草活性的影響。結(jié)果表明黃花蒿除草活性物質(zhì)的最優(yōu)提取條件為:采集6月份的黃花蒿葉部，用80％乙醇在超聲功率為800w和超聲時(shí)間30mins的條件下，料液比1∶20，第一次攪拌提取8h后超聲30mins，抽濾后留濾液，第二次向?yàn)V渣加入300mL80％乙醇攪拌

4、提取6h后超聲30mins，抽濾后留濾液，第三次向?yàn)V渣加入300mL80％乙醇攪拌提取6h后超聲30mins，抽濾后留濾液。此提取方法提取的黃花蒿葉部乙醇提取物在濃度2.0mg/mL時(shí)，處理72h后對(duì)蘿卜種子芽長(zhǎng)和根長(zhǎng)的抑制率分別為82.05％和82.21％，對(duì)蘿卜種子萌發(fā)的ED50為0.75mg/mL，ED90為1.4mg/mL。
　　2.采用室內(nèi)生物測(cè)定法，以反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草為受體植物，研究了黃花蒿乙醇提取物對(duì)不同雜

5、草種子萌發(fā)的影響，結(jié)果表明:黃花蒿葉部乙醇提取物對(duì)反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草四種雜草種子的萌發(fā)均有不同程度的抑制作用。黃花蒿葉部乙醇提取物5.0mg/mL處理對(duì)四種雜草種子萌發(fā)的抑制作用由強(qiáng)到弱的順序?yàn)?反枝莧＞苘麻＞狗尾草＞稗草，對(duì)反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草發(fā)芽率的抑制率分別為90.09％、85.79％、85.46％和14.23％。
　　3.采用室內(nèi)生物測(cè)定法，以反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草為受體植物，研究了黃花蒿乙醇提取物對(duì)不同

6、雜草的土壤處理活性，結(jié)果表明:在5.0kg/hm2時(shí)，黃花蒿葉部乙醇提取物對(duì)供試雜草的土壤處理活性由強(qiáng)到弱的順序?yàn)?反枝莧＞苘麻＞稗草＞狗尾草。處理后14天，對(duì)反枝莧、苘麻、稗草和狗尾草的株活性分別為47.50％、43.94％、25.86％和22.97％，鮮重活性分別為49.59％、26.50％、21.05％和20.50％。
　　4.采用室內(nèi)生物測(cè)定法，以大豆、玉米、小麥、高粱、紅豆和綠豆為受體，研究了黃花蒿葉部乙醇提取物對(duì)不同作

7、物種子萌發(fā)的影響。結(jié)果表明:黃花蒿葉部乙醇提取物對(duì)大豆、玉米、小麥和綠豆的萌發(fā)均沒(méi)有抑制作用。黃花蒿葉部乙醇提取物5mg/mL處理對(duì)紅豆萌發(fā)有輕微的抑制作用，抑制率為9.26％，對(duì)高粱萌發(fā)的抑制作用較強(qiáng)，抑制率為86.36％。
　　5.從黃花蒿葉部乙醇提取物對(duì)蘿卜萌發(fā)生理的影響方面，探討了黃花蒿葉部乙醇提取物的除草機(jī)制。黃花蒿葉部乙醇提取物1.0mg/mL、2.0mg/mL和3.0mg/mL處理7d后，蘿卜種子的吸水量明顯減少，且

8、隨提取物濃度的增加吸水量減少;蘿卜種子中的淀粉含量下降，可溶性糖和可溶性蛋白含量均上升。
　　6.黃花蒿葉部乙醇提取物經(jīng)系統(tǒng)溶劑分離后，濃度為0.2mg/mL的石油醚相對(duì)種子萌發(fā)的抑制率最高，為90.91％，高于乙酸乙酯相和正丁醇相的萌發(fā)抑制率50.22％和19.18％。通過(guò)用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇體系為洗脫液，對(duì)黃花蒿葉部乙醇提取物進(jìn)行柱層析分離，共獲得33個(gè)流分。采用生物測(cè)定活性跟蹤，從中確定出除草活性最強(qiáng)的流分為6號(hào)樣品。