鋅指蛋白A20mRNA表達(dá)與脊髓性肌萎縮癥細(xì)胞凋亡的關(guān)系.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文鋅指蛋白A20mRNA表達(dá)與脊髓性肌萎縮癥細(xì)胞凋亡的關(guān)系姓名：彭晶晶申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：楊曉蘇20070501碩士學(xué)位論文 中文摘要2 用B 一巰基乙醇、二甲基亞礬、丁羥茴醚將M S C s 定向分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞( n e u r o n - l i k ec e l l s ，N L C s ) ，并通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變及神經(jīng)元特異性烯醇化酶( n e u r o n s p e c i f

2、i ce n o l a s e ，N s E ) 、神經(jīng)絲蛋白( n e u r o f i l a m e n t ，N F ) 的免疫熒光檢測(cè)進(jìn)行鑒定。3 繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，觀察細(xì)胞增殖變化。4 T U N E L 熒光染色觀察細(xì)胞凋亡。5R T —P C R 檢測(cè)比較各組細(xì)胞A 2 0 ，S i N 及C a s p a s e 3 m R N A 的表達(dá)。6 免疫熒光共聚焦觀察A 2 0 ，f l —S 心及C a s p a

3、 s e 一3 蛋白的共定位情況。結(jié)果：1 鑒定M S C s 后顯示C D 3 4 為陰性，C D 4 4 為陽(yáng)性，證實(shí)為M S C s 。2 誘導(dǎo)5 小時(shí)后，大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)轭愃朴谏窠?jīng)元的形態(tài)，有長(zhǎng)的突起，相互之間連接呈網(wǎng)狀。N S E 、N F 表達(dá)均為陽(yáng)性，證實(shí)為N L C s 。3 各組細(xì)胞均經(jīng)過了兩次負(fù)增殖過程，在第2 次負(fù)增殖中，S M A細(xì)胞的負(fù)增殖較對(duì)照組N L C s 增加( P < 0 ．0 5 ) ，V P

4、 A 干預(yù)后負(fù)增殖減小( P < 0 。0 5 ) 。4 S M A 細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組N L C s 明顯增高( P ( 0 ．0 5 ) ；V P A 干預(yù)后S M A 細(xì)胞凋亡率降低( P < 0 ．0 5 ) ，對(duì)照組N L C s 凋亡率增加( P < O ．0 5 ) 。5 S M A 細(xì)胞的A 2 0 、f l —S M N m R N A 表達(dá)低于對(duì)照組N L C s ( P < 0 ．0 5 )