2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、PPT(Phosphinothricin)是一種非選擇性的除草劑,作為谷氨酰胺合成酶(Glutaminesynthetase,GS)的一種不可逆抑制劑,PPT可引起多種代謝紊亂并導致植物死亡。bar基因編碼的膦絲菌素乙酰轉移酶(phosphinthricinacetyltransferase,PAT),可使PPT的自由氨基乙?;瘡亩鴮PT解毒。甜菜是我國重要的糖料作物,但對包括PPT在內的除草劑十分敏感。因此,本研究選用了具有多種優(yōu)點

2、的葉綠體轉化方式,通過構建甜菜葉綠體轉化載體,優(yōu)化甜菜遺傳轉化條件,擬獲得轉bar基因甜菜再生植株。這項研究可為今后選育抗除草劑甜菜品種提供親本材料。
  通過對甜菜外植體分化再生研究,建立并優(yōu)化了甜菜再生體系,獲得了大量無菌苗用于后續(xù)實驗。通過對甜菜離體葉柄的抗生素敏感性研究,確定了卡那霉素和壯觀霉素的適宜篩選濃度,分別為50mg/L和40mg/L。統(tǒng)計學分析顯示,壯觀霉素的抑制作用要強于卡那霉素,由于壯觀霉素是目前葉綠體轉化中

3、應用的最廣泛的抗生素之一,因此,本研究采用壯觀霉素作為篩選用抗生素,以40mg/L作為篩選濃度。
  成功地構建了bar基因甜菜葉綠體表達載體pSARBar,其中含有bar基因表達盒、aadA篩選標記基因表達盒及同源片段atpB/rbcL,經(jīng)酶切鑒定證明了其正確性。采用基因槍法將甜菜葉綠體表達載體pSARBar轉化甜菜,經(jīng)抗性篩選、誘導分化,獲得一批抗性芽,多次繼代后,最終獲得26株抗性植株。對其中部分抗性植株進行PCR檢測,結果

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