桔梗皂苷類成分分離鑒定及其結(jié)構(gòu)與表面活性及溶血毒性的關(guān)系.pdf

1、本研究以深入有效地開(kāi)發(fā)利用桔梗資源為目的，依據(jù)物理化學(xué)和天然藥物化學(xué)、藥理學(xué)的理論與方法，以桔梗總皂苷、桔梗總次皂苷為原料，研究桔梗的皂苷類化合物的表面活性之間的關(guān)系、溶血毒性之間的關(guān)系、表面活性與溶血毒性之間的關(guān)系。 桔梗皂苷有廣泛的生物活性，主要用于祛痰、鎮(zhèn)咳，即是利用其表面活性。而桔梗皂苷具有明顯的溶血毒性，本論文研究其溶血毒性與結(jié)構(gòu)之間的構(gòu)效關(guān)系，為尋找降低桔?？傇碥杖苎拘缘姆椒ㄌ峁├碚摶A(chǔ)。以期尋找具有藥理活性與原天

2、然皂苷相似或優(yōu)于原天然皂苷的成分，而毒性小于原天然皂苷的成分。 采用硅膠柱分離、低壓Rp-C18柱分離、離心薄層分離、高速逆流色譜分離技術(shù)，結(jié)合TLC薄層在三種展開(kāi)劑條件下展開(kāi)鑒定。從桔?？偞卧碥辗蛛x得到5個(gè)化合物，分別為化合物Ⅰ～Ⅴ。從桔?？傇碥辗蛛x得6個(gè)化合物，分別為化合物Ⅵ～Ⅺ。 經(jīng)TLC、IR、1H-NMR、13C-NMR及MS等波譜技術(shù)結(jié)合化合物理化性質(zhì)，鑒定了11個(gè)化合物，分別是：化合物Ⅰ為3-0-β-D-葡

3、萄吡喃糖基遠(yuǎn)志酸；化合物Ⅱ?yàn)?-0-β-昆布二糖基桔梗皂苷元；化合物Ⅲ為3-0-β-龍膽二糖基桔梗皂苷元；化合物Ⅳ為2-0-甲基-3-0-β-D-吡喃葡萄糖基桔梗酸A甲酯；化合物Ⅴ為3-0-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖基(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖基-2β，3β，16α，23，24-五羥基齊墩果-12-烯-28-酸；化合物Ⅵ為桔梗皂苷A；化合物Ⅶ為桔梗皂苷C；化合物Ⅷ為桔梗皂苷E；化合物Ⅸ為2”-0-乙?；h(yuǎn)志

4、皂苷D2或3”-0-乙?；h(yuǎn)志皂苷D2；化合物Ⅹ為桔梗皂苷D3；化合物Ⅺ為桔梗皂苷D。 在恒溫20℃時(shí)，采用吊環(huán)法測(cè)定桔?？傇碥铡⒔酃？偞卧碥账芤翰煌瑵舛认碌谋砻鎻埩?。實(shí)驗(yàn)表明：桔?？傇碥?、桔?？偞卧碥站忻黠@的表面活性，表面張力的降低與濃度有關(guān)，桔梗總皂苷可以使水溶液表面張力降低41.2％，此時(shí)濃度為3.57mg/ml。同種方法測(cè)定各化合物在相同摩爾濃度下的水溶液表面張力，依據(jù)表面張力下降的百分率大小比較各化合物在該濃度下表

5、面活性的大小。實(shí)驗(yàn)表明：?jiǎn)翁擎溰眨跐舛?×10-4mol/L時(shí)隨著糖鏈的增長(zhǎng)，表面張力下降越少，表面活性降低。雙糖鏈苷，在濃度2×10-4mol/L時(shí)隨著糖鏈的增長(zhǎng)，有近似趨勢(shì)。皂苷作為非離子表面活性劑，具有親水和親油兩種活性基團(tuán)，隨著糖鏈的增長(zhǎng)分子平衡性減弱，表面活性降低。 根據(jù)紅細(xì)胞釋放出的血紅素的量與510nm處吸光度成正比，采用分光光度法測(cè)定桔?？傇碥?、桔?？偞卧碥諏?duì)雞血的體外溶血反應(yīng)。結(jié)果表明溶血作用明顯，溶血強(qiáng)度與

6、皂苷濃度呈劑量依賴性。總皂苷與總次皂苷的溶血率-時(shí)間曲線均呈S型，其溶血不是勻速的，而且溶血所需要的時(shí)間隨皂苷類成分種類、濃度而變化?？傇碥盏娜苎拘源笥诳偞卧碥?，約為50倍左右。同種方法測(cè)定各個(gè)化合物相同摩爾濃度時(shí)的溶血效應(yīng)，依據(jù)相同濃度化合物所得510nm處吸光度的大小比較溶血毒性的大小。實(shí)驗(yàn)表明皂苷各個(gè)化合物溶血毒性均大于次皂苷各個(gè)化合物，即桔梗的雙糖鏈苷溶血毒性大于單糖鏈苷。單糖鏈苷隨糖鏈的增長(zhǎng)，溶血毒性下降。雙糖鏈苷隨糖鏈的增