胡椒葉抗氧化能力分析及其活性成分分離鑒定.pdf

1、胡椒是世界上重要的香辛料之一，具有多種醫(yī)療保健價值，中國胡椒種植面積和產(chǎn)量分別居世界的第6位和第5位，其中海南省占據(jù)90％以上，但是胡椒加工產(chǎn)品多為初級產(chǎn)品，附加值低，限制了胡椒產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
　　然而，胡椒葉卻具有潛在的開發(fā)利用價值，胡椒果與胡椒葉都具有顯著的抗氧化作用，同時胡較葉具有顯著的抗動脈粥樣硬化功能，而且人們對胡椒葉有食用實踐，但人們對胡椒葉的活性因子并不清楚。另外，摘葉可以提高胡椒的產(chǎn)量，而且胡椒葉精油有可能代替價格較

2、高的胡椒果精油。為了給胡椒葉開發(fā)利用提供理論依據(jù)，本文系統(tǒng)地分析了胡椒葉的抗氧化活性，探明了胡椒葉的精油成分并分離鑒定了胡椒葉醇提物中的抗氧化活性因子，具體如下:
　　采用DPPH·清除能力檢測方法與多酚含量測定方法以及ORAC（氧自由基清除能力）檢測方法，系統(tǒng)地比較了胡椒葉與胡椒果（胡椒鮮果、白胡椒和黑胡椒）的抗氧化能力，并用HPLC分析比較胡椒葉與胡椒果所含物質(zhì)種類的大致差別。結(jié)果表明胡椒葉的水和丙酮提取物的DPPH·清除能力

3、和多酚含量及ORAC值均高于胡椒果（胡椒鮮果、白胡椒和黑胡椒），其中胡椒葉的ORAC值為3639.05μmolTE/g。另外HPLC表明胡椒葉所含物質(zhì)與胡椒果所含區(qū)別較大?？傮w表明胡椒葉中可能含有高抗氧化活性因子。
　　先對胡椒的揮發(fā)性成分進行分析，采用水蒸氣蒸餾法提取胡椒鮮果、黑胡椒、白胡椒和胡椒葉中的精油，得率分別為1.46％、1.77％、2.30％和1.25％。對精油進行GC-MS分析，分別鑒定出38、31、36和63種成分

4、。δ-欖香烯、3-蒈烯、D-檸檬烯、α-古巴烯、石竹烯和葎草烯在果與葉中含量均較高;蒎烯、月桂烯、α-水芹烯和間傘花素在果中含量較高，而在葉中含量較低;甘香烯、α-蓽澄茄油烯、β-欖香烯、α-古蕓烯、β-古巴烯、α-蛇床烯、花柏烯、4-異亞丙烯-7-甲基-6-亞甲基-2-辛烯酸甲酯和桉油烯醇在葉中含量較高，而在果中含量較低或沒有。此外，采用電子鼻技術(shù)結(jié)合判別函數(shù)分析可有效區(qū)分胡椒果和胡椒葉。其中在葉中含量為38.54％的δ-欖香烯具有顯

5、著的抗腫瘤活性。
　　為了確定胡椒葉活性成分的提取條件，采用系統(tǒng)溶劑提取法處理胡椒葉，確定了胡椒葉的乙醇提取液和水提取液具有較強的DPPH自由基清除能力和較高的多酚含量，并且乙醇提取液的ORAC值最高;通過對不同成熟度的胡椒葉的DPPH自由基清除能力和多酚含量的測定，表明胡椒老葉的多酚含量及抗氧化活性相對較高，采用不同濃度的乙醇水溶液室溫浸提胡椒老葉，表明40％的乙醇水溶液提取液的清除自由基能力較強，黃酮含量較高，60％的乙醇水溶

6、液提取液的多酚含量高。比較了兩種不同干燥方式所得胡椒葉乙醇提取物的DPPH自由基清除能力和物質(zhì)組成方式，冷凍干燥所得樣品的清除自由基能力高于熱風干燥，HPLC分析表明兩種干燥方式所得樣品物質(zhì)組成差異較小。
　　由于美國、歐洲、日本等國家的功能食品企業(yè)普遍采用ORAC作為功能食品的重要評價標準，本節(jié)以ORAC檢測方法作為分離鑒定抗氧化活性物質(zhì)的追蹤方法。對胡椒葉乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，對乙酸乙酯部分和正丁醇部分