不同波長的閃爍光誘導豚鼠形成近視與乙酰膽堿M1受體在眼內(nèi)的表達.pdf

1、目的：研究閃爍光誘導性近視眼鞏膜、脈絡(luò)膜、視網(wǎng)膜中乙酰膽堿M1受體的表達，研究不同波長的閃爍光誘導新生豚鼠形成近視眼的發(fā)生機制，明確乙酰膽堿M1受體在后極部眼球壁的分布及其在近視形成中的作用。 方法：選擇健康、雙眼屈光度相同、出生15～20天的豚鼠24只，隨機分為6組，每組4只；Ⅰ組用紅色閃爍光照射，Ⅱ組用黃色閃爍光照射，Ⅲ組用綠色閃爍光照射，Ⅳ組用白色閃爍光照射，以上四組均放在完全密閉的紙箱中飼養(yǎng)，Ⅴ組用正常自然光照射，放在四

2、周密閉而上方開放的紙箱中飼養(yǎng)，Ⅵ組用正常自然光照射，放在視野開闊的籠中飼養(yǎng)。分別在實驗前、實驗八周時用散瞳檢影驗光法測量6組動物的屈光度，用A超測量眼軸長度。用SPSS12.0統(tǒng)計軟件分析各組之間屈光度和眼軸長度差異。實驗八周后，用過量麻醉法處死動物，摘除眼球，去除赤道前的組織及玻璃體，分離視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜組織，分別提取視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜組織中的RNA，用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜組織中M1受體

3、mRNA的表達，分析6組之間M1受體mRNA表達最的差異。用過量麻醉法處死動物的同時，將眼球放入快速固定液(10％甲醛+75％酒精+丙乙酸)中固定，通過免疫組化法觀察M1受體在視網(wǎng)膜各層細胞中的表達。 結(jié)果：實驗前，Ⅰ組屈光度為+3.09±0.75D，眼軸長度為7.58±0.31mm，Ⅱ組屈光度為+2.93±1.02D，眼軸長度為7.54±0.43mm，Ⅲ組屈光度為+2.86±0.22D，眼軸長度為7.51±0.22mm，Ⅳ組屈

4、光度為+3.17±0.98D，眼軸長度為7.61±0.55mm，Ⅴ組屈光度為+3.05±0.54D，眼軸長度為7.66±0.16mm，Ⅵ組屈光度為+2.89±0.96D，眼軸長度為7.53±0.34mm，統(tǒng)計學分析，6組間屈光度和眼軸長度無顯著性差異(P＞0.05)。實驗八周后，Ⅰ組屈光度為-8.75±1.13D，眼軸長度為8.96±0.18mm，Ⅱ組屈光度為-6.56±0.98D，眼軸長度為8.61±0.27mm，Ⅲ組屈光度為-3.8

5、8±0.87D，眼軸長度為8.32±0.78mm，Ⅳ組屈光度為-4.84±0.76D，眼軸長度為8.42±0.49mm，Ⅴ組屈光度為+0.75±0.59D，眼軸長度為8.10±0.35mm，Ⅵ組屈光度為+1.69±0.70D，眼軸長度為8.00±0.53mm，統(tǒng)計學分析，Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ.Ⅳ組與Ⅴ組間屈光度和眼軸長度有顯著性差異(P＜0.05)，Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ組間屈光度和眼軸長度有顯著性差異(P＜0.05)，Ⅴ.Ⅵ組間屈光度和眼軸長度有顯著性差異

6、(P＜0.05)。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)結(jié)果顯示6組實驗動物的鞏膜組織、視網(wǎng)膜組織均有乙酰膽堿M1受體mRNA的表達，脈絡(luò)膜組織沒有M1受體mRNA的表達。凝膠圖像分析結(jié)果顯示，Ⅰ組鞏膜組織的M1受體mRNA的相對含量為30.12±2.16，Ⅱ組為38.75±3.47，Ⅲ組為58.40±2.73，Ⅳ組為57.19±3.32，Ⅴ組為70.59±1.89，Ⅵ組為72.60±2.81，統(tǒng)計學分析，Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ.Ⅳ組與Ⅴ組間有顯著差異(P＜0.01)

7、，Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ組間有顯著差異(P＜0.01)，Ⅴ.Ⅵ組間有顯著差異(P＜0.01)；Ⅰ組視網(wǎng)膜組織的M1受體mRNA的相對含量為31.82±2.39，Ⅱ組為35.54±2.97，Ⅲ組為56.38±3.34，Ⅳ組為55.67±2.53，Ⅴ組為70.16±2.45，Ⅵ組為73.34±2.83，統(tǒng)計學分析，Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ.Ⅳ組與Ⅴ組間有顯著差異(P＜0.01)，Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ組間有顯著差異(P＜0.01)，Ⅴ.Ⅵ組間有顯著差異(P＜0.01)。