Simvastatin對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)鉗夾損傷后脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性及神經(jīng)修復(fù)作用的影響.pdf

1、背景及目的：他汀類(lèi)藥物(Statins)是3-羥-3-甲基戊二酰輔酶A(3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzymeA，HMG-CoA)還原酶抑制劑，為當(dāng)前臨床應(yīng)用最廣泛的調(diào)脂藥物。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，該類(lèi)藥物通過(guò)抑制小GTP結(jié)合蛋白R(shí)ac、Ras和Rho等發(fā)揮其非降血脂的多效性效應(yīng)，在腦中風(fēng)、老年性癡呆、新生動(dòng)物缺血缺氧性腦損傷和多發(fā)性硬化等神經(jīng)系統(tǒng)疾病中發(fā)揮了重要的神經(jīng)保護(hù)作用。最近臨床前研究顯示調(diào)控RhoGTP

2、酶(Rac,Rho,Cdc42,Tc10)的作用有可能促進(jìn)神經(jīng)損傷后功能的恢復(fù)。因此提示Statins在神經(jīng)系統(tǒng)另一發(fā)病率很高的疾病—周?chē)窠?jīng)損傷中有可能通過(guò)其非降血脂的多效性效應(yīng)促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)和再生。近年來(lái)的研究顯示，周?chē)窠?jīng)損傷后由受損神經(jīng)元介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞的激活促進(jìn)損傷運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的修復(fù)，是神經(jīng)再生過(guò)程的重要組成部分。因此本實(shí)驗(yàn)研究的主要目的在于探討周?chē)窠?jīng)損傷與修復(fù)過(guò)程中脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性，并闡明Simvastatin對(duì)坐骨神經(jīng)

3、損傷的修復(fù)和再生作用以及可能的作用機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)材料與方法：實(shí)驗(yàn)選用健康成年雌性Sprague-Dawley大鼠60只為研究對(duì)象，隨機(jī)分為3組：模型組，Simvastatin干預(yù)組和假手術(shù)組。建立坐骨神經(jīng)鉗夾損傷模型，給予Simvastatin(20mg/kg/d)灌胃治療，每天一次，連續(xù)灌胃兩周。于術(shù)后一個(gè)月以內(nèi)進(jìn)行行為學(xué)觀察及趾展功能指數(shù)測(cè)定，2w和4w時(shí)進(jìn)行神經(jīng)傳導(dǎo)速度以及復(fù)合肌肉動(dòng)作電位電檢測(cè)。4w時(shí)甲苯胺藍(lán)染色記數(shù)有髓神

4、經(jīng)纖維數(shù)量與髓鞘厚度，電鏡觀察再生神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)變化。于術(shù)后3d、7d取L5段脊髓，切片進(jìn)行Nissl染色和OX-42免疫組織化學(xué)染色，觀察大鼠坐骨神經(jīng)損傷后相應(yīng)脊髓節(jié)段中神經(jīng)元和小膠質(zhì)細(xì)胞的變化。 結(jié)果：Simvastatin干預(yù)組較模型組足趾展開(kāi)速度快，尤其是手術(shù)后5d和8d，組間差異顯著(P＜0.05)；2wSimvastatin干預(yù)組較模型組內(nèi)踝水平CMAP幅度增高(P＜0.05)，4w時(shí)Simvastatin干預(yù)組內(nèi)踝水

5、平和坐骨切跡水平CMAP幅值均高于模型組高(P＜0.05，P＜0.01)，NCV明顯快于模型組(P＜0.05)；光鏡下觀察，術(shù)后4wSimvastatin干預(yù)組再生神經(jīng)纖維密度較模型組高，排列較整齊，單位視野下再生有髓神經(jīng)纖維數(shù)量高于模型組(P＜0.01)，髓鞘厚度與模型組相比有所增加(軸突直徑與有髓纖維直徑比降低，P＞0.05)；術(shù)后4w的透射電鏡結(jié)果顯示，Simvastatin干預(yù)組再生神經(jīng)纖維較粗大，Schwann細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)

6、胞器，胞漿、胞核中染色質(zhì)豐富，而模型組Schwann細(xì)胞染色質(zhì)不豐富，核不規(guī)則，核膜潰變；神經(jīng)損傷后相應(yīng)脊髓節(jié)段中Nissl染色顯示，術(shù)后7dSimvastatin干預(yù)組和模型組腹角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷同側(cè)數(shù)量與對(duì)側(cè)之比明顯低于假手術(shù)組(P＜0.05)，而Simvastatin干預(yù)組略高于模型組，但無(wú)顯著差異((P＞0.05)；OX-42的免疫組織化學(xué)染色顯示，Simvastatin干預(yù)組OX-42陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量較模型組與假手術(shù)組增多((P＜0

7、.05)、染色強(qiáng)度增強(qiáng)(P＜0.05)，提示Simvastatin可促進(jìn)神經(jīng)損傷后組織結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù)，其作用可能與小膠質(zhì)細(xì)胞的激活有關(guān)。 結(jié)論：一、本實(shí)驗(yàn)通過(guò)趾展功能指數(shù)測(cè)定，神經(jīng)電生理學(xué)檢測(cè)和組織形態(tài)學(xué)觀察證實(shí)，Simvastatin可促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)鉗夾損傷后神經(jīng)的修復(fù)和再生。二、大鼠坐骨神經(jīng)鉗夾損傷后，相應(yīng)脊髓節(jié)段腹角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)量減少，腹角和背角小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增強(qiáng)。三、Simvastatin干預(yù)組脊髓內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)