胰島素肺部吸入粉霧劑的研究.pdf

1、本研究以胰島素為模型藥物，系統(tǒng)地研究了胰島素肺部吸入粉霧劑的處方和制備工藝，對其理化性質(zhì)進行了評價，并對該粉霧劑在大鼠體內(nèi)的藥效學(xué)進行了研究，具體內(nèi)容分為以下幾大部分：
　　 1胰島素含量及相關(guān)蛋白質(zhì)測定方法的建立
　　 在參考國內(nèi)外相關(guān)文獻的基礎(chǔ)上，建立了HPLC方法作為胰島素含量及相關(guān)蛋白質(zhì)的測定方法，該法簡單可行，專屬性好。含量測定線性范圍為0.040 mg·mL-1～0.605 mg·mL-1?；貧w方程及相關(guān)系數(shù)

2、如下：A=19197258C-128950，r=0.9995；精密度、重現(xiàn)性良好，RSD值分別為0.77％，1.58％：回收率為101.4：t=2.1％。
　　 2粉霧劑質(zhì)量評價指標(biāo)的建立
　　 建立了胰島素肺部吸入粉霧劑的多項評價指標(biāo)，為制劑的評價提供合理依據(jù)，主要分為兩大類評價指標(biāo)：(1)與粉霧劑相關(guān)的典型理化性質(zhì)：溶解性、引濕性、水分含量、表面形態(tài)、粒度及其分布、密度與壓縮度、休止角；(2)體外沉積效果評價指標(biāo)：霧

3、化特性、體外沉積性質(zhì)、排空率。
　　 3胰島素肺部吸入粉霧劑的制備
　　 采用噴霧干燥法制備胰島素肺部吸入粉霧劑，重點對處方和工藝參數(shù)進行了研究。處方中考察了碳水化合物類(乳糖、甘露醇、海藻糖、右旋糖苷)、氨基酸類(亮氨酸、甘氨酸、蘇氨酸)、有機鹽類(枸櫞酸.枸櫞酸鈉)等物質(zhì)對胰島素吸入粉霧劑主要理化性質(zhì)的影響。四種碳水化合物在噴霧干燥過程中均對胰島素有保護作用，與理論含量相比，噴霧干燥后胰島素含量維持在96％左右。甘露

4、醇表現(xiàn)出明顯的抑濕作用，RH75％時吸濕增重僅為8.2±0.9％。甘氨酸雖然是一種良好的低密度添加劑(密度與不加甘氨酸相比約下降20％)，但它的加入?yún)s使粉霧劑的體外沉積性變差，而亮氨酸卻能顯著提高粉霧劑的有效部位沉積量(約升高11％)。在對甘露醇及亮氨酸用量進行研究后，確定處方如下：胰島素1000 mg，甘露醇3300 mg，L-亮氨酸500 mg，枸櫞酸660 mg，氫氧化鈉適量。工藝研究中，在單因素考察的基礎(chǔ)上，以產(chǎn)品收率、粉末的空

5、氣動力學(xué)徑、休止角及水分含量為考察指標(biāo)，采用正交設(shè)計Z綜合評價法優(yōu)化噴霧干燥制備方法中的各工藝參數(shù)(進口溫度、供液速度、霧化壓力和溶液濃度)。確定制備工藝條件為：進口溫度：100℃；噴霧速度：5.0 ml·min-1；噴氣壓力：130KPa；抽吸流量：0.60 L·min-1；溶液濃度：0.75％(w/v)。
　　 4粉霧劑的評價和初步穩(wěn)定性研究
　　 胰島素肺部吸入粉霧劑理化性質(zhì)測定表明，本品具有引濕性；流動性稍差，其

6、休止角為43.5±3.6，壓縮度為36.6±1.7％；相關(guān)蛋白質(zhì)、水分含量分別為3.68±0.4％、3.1±0.3％；本品的空氣動力學(xué)徑約為2μm，預(yù)示該粉霧劑能夠深入到肺部；其含量均勻度和溶解性均符合相關(guān)規(guī)定。吸入模擬試驗評價指標(biāo)的測定表明本品的霧化性能好，排空率為91.6％，有效部位沉積量高達(dá)67.9％，進一步預(yù)示該粉霧劑經(jīng)吸入給藥后大部分能夠沉積于肺部。小鼠血糖法測得胰島素吸入粉霧劑的效價為4.99 U·mg-1，與理論效價相比為

7、97.4％，可信限率為8.17％，該法所測得效價值與高效液相色譜法所測含量96.2±0.2％基本一致。
　　 穩(wěn)定性試驗研究表明本品在4～8℃，RH<25％的條件下放置3個月，其外觀性狀、粒徑及其分布、含量、相關(guān)蛋白質(zhì)以及體外沉積性質(zhì)均無明顯改變。
　　 5體內(nèi)藥效學(xué)研究
　　 建立了胰島素吸入粉霧劑肺部給藥正常大鼠模型，以低、中、高(5、10、15 U·kg-1)三個劑量進行降血糖實驗，并與空白組進行比較。采用

8、葡萄糖氧化酶法測定了大鼠血糖變化情況，采用梯形法計算血糖變化曲線上的面積，以皮下注射為對照計算胰島素吸入粉霧劑的藥理相對生物利用度(PA％)。以5、10 U·kg-1的劑量給藥時，血糖最低水平分別在56.3％和41.5％左右，PA％分別為23.7％和15.6％，達(dá)到最低血糖水平的時間約為90 min；當(dāng)給藥劑量為15 U·kg-1時，于120 min達(dá)到最低血糖水平(27.4％)，PA％值為14.8％。該結(jié)果表明給藥劑量升高，生物利用度